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1、隨著社會(huì)的不斷發(fā)展,重金屬污染問題日趨嚴(yán)重,其中高濃度銅離子環(huán)境會(huì)引起人體胃腸道紊亂,甚至可能損害肝臟和腎臟,當(dāng)機(jī)體內(nèi)銅離子濃度超出一定范圍時(shí),還會(huì)引起嚴(yán)重的銅代謝障礙疾病。因此,如何快速檢測(cè)環(huán)境、食品以及生物體中的銅離子就顯得尤為重要。而熒光探針檢測(cè)法具有簡(jiǎn)單快速、檢測(cè)費(fèi)用低、選擇性專一、靈敏度高、可進(jìn)行原位和可視化檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn),近紅外熒光探針更是具有波長(zhǎng)較長(zhǎng),可減小背景干擾的優(yōu)勢(shì),因此設(shè)計(jì)合成銅離子的近紅外熒光探針具有重要意義。
2、> 本論文設(shè)計(jì)合成了兩種中位氨基取代的七甲川花菁類小分子熒光探針Cy-TMPA和Cy-15C5。選擇吡啶衍生物和冠醚15-C-5連接氨甲基側(cè)臂分別作為識(shí)別基團(tuán),均以七甲川花菁IR-780作為熒光團(tuán),通過親核取代反應(yīng)合成熒光探針。用硅膠柱層析法對(duì)粗產(chǎn)品進(jìn)行純化,用質(zhì)譜儀、核磁等方法對(duì)合成產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)、表征。
以Cy-15C5作為銅離子熒光探針,建立了銅離子的簡(jiǎn)單、快速、靈敏和可視化熒光淬滅型的熒光探針檢測(cè)方法。實(shí)驗(yàn)表明:當(dāng)探針
3、溶于乙腈/HEPES緩沖溶液(v∶v=1∶1000)中,pH=7.0,探針濃度為10μmol L-1時(shí),探針的熒光強(qiáng)度最大。其最大激發(fā)為682 nm,發(fā)射波長(zhǎng)為760 nm,Stokes位移增大至78 nm。向熒光探針Cy-15C5溶液中滴加銅離子,溶液的熒光強(qiáng)度下降,裸眼可見溶液的顏色由藍(lán)綠色變?yōu)闇\粉色,可為可視化檢測(cè)提供一種方法。在其他金屬離子干擾的情況下,熒光探針對(duì)銅離子仍具有良好的選擇性。在最佳條件下,探針的熒光強(qiáng)度與銅離子含量
4、的線性關(guān)系符合Stem-Volmer公式,所得出的線性方程式為F0/F=0.304×[Cu2+]+0.935(μmol L-1),其中R2=0.994,線性范圍為1.0×10-6~1×10-5 mol L-1,該探針的檢出限為8.3×10-7molL-1,對(duì)銅離子具有較高的靈敏度。
此外,將該熒光探針方法應(yīng)用于水樣和谷物中銅離子的檢測(cè)。實(shí)際水樣在三個(gè)添加水平下的添加回收率較高為88.7%~110.8%。谷物樣品通過熒光探針法和
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