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文檔簡介
1、硫酸酯化多糖因具有優(yōu)越的抗凝血活性而受到了研究者的重視,而柑橘果膠作為植物性來源多糖以其結(jié)構(gòu)簡單、重復(fù)性高而具有極大的硫酸酯化開發(fā)潛質(zhì)。本研首次究采用TBA和DMSO兩種體系作為制備硫酸酯化果膠的環(huán)境,對(duì)酯化條件、凝血效果、凝血路徑、效應(yīng)結(jié)構(gòu)和其他生物活性等方面進(jìn)行了探究。主要結(jié)果如下:
1.硫酸酯化果膠的制備及基本指標(biāo)測定
采用通過TBA和DMSO兩種體系制備。根據(jù)測得的基本參數(shù)可以推斷,分子鏈隨著酯化時(shí)間的增加而
2、發(fā)生劇烈降解,主鏈支鏈糖類都發(fā)生了減少,其中主鏈降解更為明顯;硫酸基已存在,且隨著酯化時(shí)間的增長而增加,而比較兩種體系而言,DMSO體系的硫酸根含量略高于TBA體系,SD-3、ZD-3分別為31.49%、23.98%,ST-3、ZT-3分別為29.81%、19.43%。
2.硫酸酯化果膠的抗凝血活性研究
對(duì)上述四種樣品進(jìn)行凝血常規(guī)三項(xiàng)測定,結(jié)果顯示,效果最好的ST-3具備較高的活性(51.9IU/mginAPTT,1
3、5.2IU/mginTT)),活性高于硫酸皮膚素,低于標(biāo)準(zhǔn)肝素(212IU/mg),凝血常規(guī)三項(xiàng)實(shí)驗(yàn)表明,樣品通過內(nèi)源性或者共同作用而致凝血更多一些,外源性的途徑可能作用比較小。
對(duì)凝血效果較顯著的ST-3和ZT-3進(jìn)行凝血因子依賴測定。結(jié)果顯示,硫酸酯化果膠的抗凝血活性呈濃度依賴性規(guī)律遞增,主要依賴HCII介導(dǎo)來抑制凝血因子的。
3.對(duì)硫酸酯化果膠的抗凝血活性機(jī)理的探究以及其他活性的測定
紅外光譜和核磁圖
4、譜的結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)硫酸基結(jié)合于多糖。由核磁圖譜推斷硫酸根基團(tuán)很可能是結(jié)合在C2和C3位。同時(shí),粒徑分布和表觀結(jié)構(gòu)測定顯示,硫酸酯化后的果膠多糖的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,產(chǎn)生扭曲和堆疊,呈現(xiàn)螺旋狀結(jié)構(gòu),且粒徑變小。除了分子量減小的原因,硫酸酯化后升高的電荷含量使原分子間的氫鍵破壞,且形成新的更致密的結(jié)構(gòu)。
而在抗金黃色葡萄球菌活性上以及FRAP測定中,抑菌性未能發(fā)現(xiàn)明顯、有規(guī)律的變化;果膠多糖硫酸酯的清除能力明顯高于原果膠多糖。這表明硫酸
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