幼年骨髓間充質(zhì)干細胞修復同種異體老年兔軟骨缺損的實驗研究.pdf

1、目的:比較幼年和老年兔骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)體外生長,增殖以及代謝活性等情況;將幼年來源的BMSCs復合載體構(gòu)建組織工程軟骨,異體移植修復老年兔關(guān)節(jié)軟骨缺損,觀察異體移植的可行性,并與老年兔自體BMSCs移植修復相比較,分析兩者的效果。
　　 方法:分別取幼年和老年新西蘭大白兔的骨髓組織,應用全骨髓培養(yǎng)+差速貼壁分離法獲取BMSCs,經(jīng)穩(wěn)定傳代至第5代后,采用細胞計數(shù)法描記細胞生長曲線,MTT法比較兩者增殖代活性。待一定

2、數(shù)量后,以膠原蛋白為載體,構(gòu)建幼年BMSCs-膠原蛋白復合物,植入老年兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損處,對照組為自體BMSCs-膠原蛋白,分別于術(shù)后6周,12周后處死,通過大體觀察,HE染色,甲苯胺藍染色,Ⅱ型膠原免疫組化,Wakitani組織學評分等,分析比較兩者的修復效果。
　　 結(jié)果:幼年和老年BMSCs兩者在體外培養(yǎng)時形態(tài)上無明顯差別,均表現(xiàn)為多核細胞為主,胞體呈多角形或長梭形,呈纖維形態(tài),但兩者的生長以及增殖代謝活性有明顯的統(tǒng)計學差

3、異(P＜0.05),幼年來源的BMSCs的體外生長,增殖代謝曲線上到達平臺期的時間(約5-6天)早于老年兔,且到達平臺期后的飽和密度也高于老年兔。幼年來源BMSCs異體移植修復老年兔關(guān)節(jié)軟骨缺損,效果明顯,12周時已與周圍正常軟骨相似,未見明顯免疫排斥反應。Wakitani組織學評分結(jié)果,與單純載體對照組相比,有顯著的統(tǒng)計學差異(P＜0.05),但與自體BMSCs移植修復相比,無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論:幼年來源