富硒靈芝菌絲體粗多糖對CNE2鼻咽癌細胞抑制作用、淋巴細胞增殖活性的研究及保健果凍的研發(fā).pdf

1、目前，對于硒和靈芝多糖的藥理研究已經(jīng)逐步深入，臨床上也有了良好的應(yīng)用。而靈芝硒多糖的研究還處于起步階段，作用機理和其他的應(yīng)用還需要更深入的研究，更多的藥理活性亟待發(fā)現(xiàn)。通過前期的市場調(diào)研發(fā)現(xiàn)，目前市場上尚未發(fā)現(xiàn)以富硒靈芝菌絲體為原料的保健食品上市。因此，通過更多的實驗驗證其安全性與有效性，并將其中的有益成分（如靈芝硒多糖）提取出來適應(yīng)大規(guī)模的工業(yè)化生產(chǎn)，將為開發(fā)具有增強免疫力的功效的保健食品提供理論參考，具有重要的研究意義和廣闊的市場前

2、景。
　　本研究的創(chuàng)新點是，應(yīng)用工業(yè)化生產(chǎn)的液體發(fā)酵技術(shù)，將硒與靈芝有機的結(jié)合在一起，研制出富硒靈芝;闡明富硒靈芝菌絲體多糖對鼻咽癌細胞和外周血來源淋巴細胞的影響，具有增強免疫功效的效果，目前關(guān)于靈芝硒多糖對于鼻咽癌細胞的增殖活性的影響尚未見報道。并研發(fā)出富硒靈芝保健果凍。
　　本研究用500L的工業(yè)發(fā)酵罐進行靈芝的富硒發(fā)酵培養(yǎng)，培養(yǎng)參數(shù)為溫度28±1℃，攪拌速率100r/min-120r/min，pH控制在6.5-7.0，

3、罐壓0.2kg/cm2-0.3 kg/cm2，通氣量0.5(V/V·min)，培養(yǎng)時間70h左右時，500L的不銹鋼發(fā)酵罐中可以生產(chǎn)發(fā)酵液300L，菌絲體濃度達到30％（濕重）以上，總糖含量在20g/L以上。并通過多次的單因素實驗，確定了富硒靈芝多糖最適合的提取條件為:中性蛋白酶添加量為1.5％(W/W)，料液比為1∶30，最適酶解溫度為50℃、pH值為5，酶解時間為60min，無水乙醇添加量為40％。并通過脫色、脫蛋白、透析等純化步驟

4、得到了較為純凈的富硒靈芝菌絲體粗多糖。對該硒多糖進行了化學(xué)性質(zhì)的檢驗。其中發(fā)酵液中總硒的含量為0.3mg/L，富硒靈芝菌絲體多糖中的硒含量為0.08mg/Kg，發(fā)酵液中的多糖含量為2.7％，砷的含量為0.01 mg/L，鉛的含量為0.05mg/L，汞的含量為未檢出(＜0.005 mg/L)。致病菌未檢出。用純化后的硒多糖進行兩項免疫功能實驗，觀察富硒靈芝菌絲體粗多糖對鼻咽癌細胞的體外增殖活性的影響，結(jié)果表明富硒組的抑制率高于普通組。另外