甘遂配伍不同比例甘草對大鼠腎臟毒性的影響.pdf

1、目的：觀察甘遂與甘草反藥對配伍水煎劑對大鼠腎臟毒性的影響及與甘草比例的關(guān)系，為指導(dǎo)臨床安全用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：8周齡 SD大鼠50只，隨機(jī)分為正常對照組，甘遂與甘草1:0、1:0.25、1:0.5、1:1配伍水煎劑組，每組10只。各配伍組甘遂劑量均為2g/kg/d（甘遂濃度為0.4g/ml/d），連續(xù)灌胃給藥28天，給藥容積為5ml/kg/d，正常對照組給予同等體積的蒸餾水。分別觀察大鼠的一般狀態(tài)；于末次給藥24h后處死

2、大鼠，取其雙側(cè)腎臟稱重，計(jì)算腎臟臟器指數(shù)；應(yīng)用 HE染色法，對大鼠腎臟組織進(jìn)行病理學(xué)檢查；應(yīng)用生化法檢測大鼠血清中肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）的含量變化；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測大鼠腎臟組織中 Bcl-2及 Bax蛋白表達(dá)水平；應(yīng)用RT-PCR法檢測大鼠腎臟組織中Bcl-2及Bax mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：1、大鼠的一般狀態(tài)：各比例配伍組大鼠給藥后出現(xiàn)精神萎靡、呼吸急促、瞇眼、行走不穩(wěn)等中毒現(xiàn)象，其中以甘遂甘草1:0配伍

3、組反應(yīng)最為明顯，且隨著甘草配伍比例的提高，中毒癥狀減輕。2對大鼠腎臟指數(shù)的影響：各給藥組大鼠腎臟指數(shù)均明顯高于正常對照組（P＜0.05或 P＜0.01）；甘遂與甘草1:0.25、1:0.5、1:1配伍組大鼠腎臟指數(shù)均明顯低于1:0配伍組（P＜0.05或P＜0.01），其毒性反應(yīng)程度依次為甘遂甘草1:0組＞1:0.25組＞1:0.5組＞1:1組。3對大鼠血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）含量的影響：各給藥組大鼠血清中 SCr、BUN含量

4、與正常對照組相比均有不同程度升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或 P＜0.01）；甘遂配伍甘草1:0組大鼠血清中 SCr、BUN含量均顯著高于1:0.25、1:0.5、1:1組（P＜0.05或 P＜0.01），各給藥組大鼠血清中 SCr、BUN含量依次為甘遂甘草1:0組＞1:0.25組＞1:0.5組＞1:1組。4對大鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)的影響：各組實(shí)驗(yàn)大鼠腎臟組織中皮質(zhì)和髓質(zhì)均界限清晰，腎小球部位結(jié)構(gòu)完整，未見腎小球發(fā)生明顯的萎縮、增生，

5、球內(nèi)毛細(xì)血管、入球小動脈未見充血擴(kuò)張以及玻璃樣變性等。集合管上皮細(xì)胞未見變性、壞死、水腫等；各配伍組大鼠腎臟組織中腎小球、集合管部位與正常對照組相比未見明顯病理變化。各配伍組大鼠腎臟組織中近曲小管、遠(yuǎn)曲小管較正常對照組相比，均有不同程度的水腫，近曲小管、遠(yuǎn)曲小管上皮細(xì)胞體積明顯增大，且細(xì)胞間隙界限不清，胞質(zhì)內(nèi)充斥淡粉色顆粒，官腔狹窄而不規(guī)則；其中以甘遂甘草1:0配伍組病理變化最為嚴(yán)重。5對大鼠腎臟組織中Bcl-2、Bax蛋白及 mRNA

6、表達(dá)的影響：各給藥組大鼠腎臟組織中 Bcl-2在蛋白及mRNA表達(dá)水平均明顯低于正常對照組（P＜0.05或 P＜0.01）；各劑量組間相比，1:0.25、1:0.5、1:1組Bcl-2在蛋白及mRNA表達(dá)水平均明顯高于1:0組（P＜0.05或 P＜0.01），其表達(dá)水平依次為甘遂甘草1:1組＞1:0.5組＞1:0.25組＞1:0組。各給藥組大鼠腎臟組織中 Bax在蛋白及 mRNA表達(dá)水平均明顯高于正常對照組（P＜0.05或 P＜0.01