奧曲肽對肝硬化門脈高壓大鼠肝臟血紅素氧合酶-1表達(dá)的影響.pdf

1、目的:肝硬化(hepatic cirrhosis)是各種慢性肝病發(fā)展的晚期階段,是各種因素長期反復(fù)作用導(dǎo)致了肝細(xì)胞損傷,并引起肝星狀細(xì)胞的活化,同時氧化應(yīng)激以及多種細(xì)胞因子也參與了本病的發(fā)生發(fā)展過程。門靜脈高壓癥(portal hypertension,PHT)是肝硬化失代償期主要的臨床表現(xiàn)之一,其引起的主要并發(fā)癥食管胃底靜脈曲張破裂出血嚴(yán)重威脅著患者的生命。血紅素氧合酶(heme oxygenase,HO)是血紅素代謝途徑中的起始酶和

2、限速酶,共有3種亞型,其中HO-1活性最高,廣泛分布于全身組織,可被多種引起細(xì)胞氧化應(yīng)激的損傷因素所誘導(dǎo),HO-1及其催化產(chǎn)物膽綠素(biliverdin)、膽紅素(biliubin)和CO(carbon monoxide,CO)在體內(nèi)均有顯著的抗炎、抗細(xì)胞增殖及調(diào)節(jié)細(xì)胞因子表達(dá)等重要作用。目前,奧曲肽(octreotide,OCT)作為臨床上常用藥物治療食管胃底靜脈曲張破裂出血,但奧曲肽在門脈高壓階段的作用機制尚不完全清楚。本研究觀察

3、奧曲肽降低門脈高壓的作用是否調(diào)控了HO-CO系統(tǒng),以探討奧曲肽降門脈高壓的可能機制,并進(jìn)一步證實HO-CO系統(tǒng)在肝硬化門脈高壓中的作用,為肝硬化門脈高壓的治療尋求新的靶點。
　　 方法:取健康雄性SD大鼠40只,隨機分成3組:假手術(shù)(SH)組8只、肝硬化門脈高壓(PH)組12只和奧曲肽(OCT)組20只。PH組應(yīng)用膽總管結(jié)扎的方法制備大鼠肝硬化門脈高壓的模型。OCT組制模方法同PH組,4周模型形成后給予奧曲肽腹腔注射,連續(xù)3天,

4、PH給予等量的生理鹽水腹腔注射。測定大鼠的門靜脈壓力和平均動脈壓后將大鼠處死,取血、取肝。通過免疫組織化學(xué)的方法觀察大鼠肝臟HO-1蛋白的表達(dá)；RT-PCR的方法觀察大鼠肝臟HO-1mRNA的水平；采用全自動生化分析儀檢測血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspartate aminotmnsferase,AST)的水平來反映肝功能；HE染色觀察肝纖維組織增生與分布情

5、況。
　　 結(jié)果:
　　 1.模型復(fù)制成功
　　 (1)PH組大鼠毛色蓬亂,活動減少,尿色黃,便色淺,食欲減退,腹部膨隆。
　　 (2)血清生化指標(biāo)ALT和AST測定結(jié)果顯示:與SH組(38.13±5.20 U/L,166.6±7.27 U/L)相比,PH組(199.25±10.05 U/L,313.63±10.65 U/L)明顯升高(P＜0.01)。
　　 (3)HE染色結(jié)果顯示PH組大鼠肝臟小

6、葉結(jié)構(gòu)紊亂形成假小葉,小葉間膽管增生,大量炎細(xì)胞侵潤。
　　 (4)與SH組(9.13±0.62 cmH2O)相比,PH組(18.47±1.81 cmH2O)門靜脈壓力顯著升高(P＜0.01)。
　　 2.奧曲肽對門靜脈壓力和平均動脈壓的影響及對肝臟的保護(hù)作用
　　 (1)與PH組相比,OCT組門靜脈壓力明顯下降(P＜0.01),平均動脈壓無明顯變化(P＞0.05)。
　　 (2)奧曲肽對肝細(xì)胞有保護(hù)作用

7、。
　　 ①與PH組相比,OCT組ALT和AST明顯下降(P＜0.01)。
　　 ②與PH組相比,OCT組纖維組織增生減輕,炎細(xì)胞浸潤減少。
　　 3.肝硬化門脈高壓大鼠肝臟HO-1表達(dá)增加,奧曲肽對HO-1的表達(dá)有抑制作用。
　　 (1)免疫組織化學(xué)方法顯示PH組較SH組HO-1染色強度增加,范圍擴大,而OCT組染色較PH組明顯減輕。
　　 (2)RT-PCR方法顯示PH組HO-1mRNA表達(dá)明