家蠶絲氨酸蛋白酶抑制劑20的表達特征分析.pdf

1、家蠶（Bombyx mori, B. mori）屬鱗翅目昆蟲，是較早完成全基因組測序的模式生物，并且是被馴化與改良的重要農(nóng)業(yè)經(jīng)濟昆蟲。絲氨酸蛋白酶抑制劑（serine proteinase inhibitor）是一類絲氨酸蛋白酶活性調節(jié)劑，參與細胞遷移、血液凝固、炎癥反應、細胞分化和凋亡、免疫、纖維蛋白溶解、及組織重建等重要過程。
　　本研究利用 pET-28a(+)表達載體在大腸桿菌 Transetta(DE3)中融合表達 Bo

2、mbyx mori serine protease inhibitor-20(BmSerpin-20)蛋白，利用純化的重組蛋白作為抗原免疫新西蘭大白兔制備多克隆抗體，利用實時定量PCR技術及Western Blot方法分別分析BmSerpin-20基因和蛋白的組織表達水平、病原物免疫刺激后的表達模式以及抗菌肽基因的表達模式。
　　在大腸桿菌中正確表達和純化了融合BmSerpin-20蛋白，并制備了多克隆抗體。BmSerpin-20

3、基因和蛋白在脂肪體、中腸、血細胞、馬氏管、表皮、睪丸、卵巢中均有表達，且在表皮中表達量最高。家蠶五齡幼蟲經(jīng)核型多角體病毒（ Nuclear polyhedrosis viruses）、藤黃微球菌（Micrococcus luteus）、大腸桿菌（Escherichia coli）、白僵菌（Beauveria bassiana）處理后，BmSerpin-20基因表達量先下調而后上調,但不同病原物在不同時間的影響不盡相同。BmSerpin-