五加科人參屬中藥皂苷類(lèi)化合物的分離提取及抗氧化活性研究.pdf

1、人參、西洋參和三七系五加科人參屬藥材中的三種重要代表，其主要有效成分均為達(dá)瑪烷型人參皂苷。大量研究結(jié)果表明：皂苷類(lèi)化合物具有較強(qiáng)的生物活性，因此，對(duì)于人參皂苷的研究和開(kāi)發(fā)具有重要的理論意義和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
　　 （1）分別采用回流、超聲和溫浸提取法對(duì)人參、西洋參和三七中的皂苷類(lèi)化合物進(jìn)行了分離提取對(duì)比研究，并應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）對(duì)皂苷類(lèi)化合物進(jìn)行定量分析，對(duì)比研究表明超聲提取法快速、安全、簡(jiǎn)便、成本低且不破壞成分，在此

2、基礎(chǔ)上，采用超聲提取法對(duì)三種藥材中的皂苷類(lèi)化合物進(jìn)行大量的分離提取，總皂苷粗提物應(yīng)用高速逆流色譜技術(shù)進(jìn)行分離純化研究。
　　 （2）本文采用高速逆流色譜技術(shù)（HPCPC）和蒸發(fā)光檢測(cè)器（ELSD）的聯(lián)用技術(shù)對(duì)皂苷類(lèi)化合物進(jìn)行分離純化，建立了HPCPC-ELSD法分離五加科人參屬中藥的皂苷類(lèi)化合物的新方法。采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2，v/v/v)為溶劑體系，經(jīng)一次分離從三七總皂苷粗提物中分離純化得到三七皂苷R1，人參皂苷

3、Rg1、Re和Rb1；采用乙酸乙酯-正丁醇-水(1:1:2，v/v/v)為溶劑體系，從西洋參總皂苷粗提物中分離得到了Re、Rb1和Rc；采用乙酸乙酯-正丁醇-水(0.8:1.2:2，v/v/v)為溶劑體系，從人參總皂苷粗提物中分離得到了人參皂苷Rb1和Rb2兩種單體皂苷。應(yīng)用HPLC-ELSD技術(shù)對(duì)分離得到的皂苷類(lèi)化合物進(jìn)行分析，通過(guò)與已知化合物的保留時(shí)間相對(duì)比，進(jìn)行定性分析；根據(jù)其峰面積百分比，確定其純度均在95％以上。應(yīng)用電噴霧串聯(lián)

4、質(zhì)譜（ESI-MSn）進(jìn)一步確定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，應(yīng)用HPCPC-ELSD從中草藥粗提物中分離無(wú)紫外吸收或者紫外末端吸收的活性物質(zhì)是一種高效可行的分離技術(shù)，HPLC-ELSD和MSn為皂苷類(lèi)化合物純度檢驗(yàn)和鑒定分析提供了較好的分析方法。
　　 （3）以人參、西洋參和三七的回流、超聲和溫浸提取的皂苷類(lèi)化合物為研究對(duì)象評(píng)價(jià)其抗氧化活性。首次采用Photochemi-luminescence (PCL)抗氧化活性體外評(píng)價(jià)體系為分

5、析平臺(tái)系統(tǒng)考察皂苷類(lèi)化合物的抗氧化活性，并利用DPPH法進(jìn)行對(duì)照評(píng)價(jià)。結(jié)果表明：三七總皂苷，超聲提取物抗氧化能力最佳，在PCL法中相當(dāng)于2.53 nmol Vc，在DPPH法中其清除率為32.57％，其總皂苷含量為209.62 mg/g；回流提取物1.71nmol、30.82％，總皂苷128.97 mg/g；溫浸提取物1.07 nmol、18.60％，總皂苷100.44 mg/g，其抗氧化能力和皂苷含量呈量效關(guān)系。對(duì)于西洋參和人參總皂苷

6、，超聲提取物皂苷含量最高（73.27 mg/g和17.48 mg/g），依次為回流（52.26 mg/g和10.42 mg/g）和溫浸提取物（48.62 mg/g和9.89 mg/g）；但在抗氧化實(shí)驗(yàn)中，回流提取物清除自由基能力（2.28 nmol和23.62％，0.63 nmol和22.98％）比超聲提取物強(qiáng)（2.18 nmol和23.51％，0.61nmol和21.20％），但兩者相差不大；溫浸提取物抗氧化能力最低（1.07 nmo