microRNA在大鼠急性胰腺炎早期變化及其意義的研究.pdf

1、目的:急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是消化系統(tǒng)常見的一種疾病，依據(jù)最新的亞特蘭大標(biāo)準(zhǔn)，可分為重度胰腺炎(severe acutepancreatitis，SAP)、中重度胰腺炎(moderately severe acutepancreatitis，MSAP)、輕度胰腺炎(mild acute pancreatitis，MAP)，不同的類型其治療的策略及預(yù)后的差異很大。MAP的病情較輕，胰腺的往往表現(xiàn)為充血水腫

2、，死亡率較低，預(yù)后較好;而SAP病情變化較大，胰腺病理多表現(xiàn)出出血壞死，伴有局部或全身的并發(fā)癥，預(yù)后差，死亡率達(dá)36-50％。所以對(duì)于重癥急性胰腺炎早期的預(yù)測(cè)及分型非常重要。常見的預(yù)測(cè)有相關(guān)的評(píng)分系統(tǒng)如急性生理和慢性健康狀況評(píng)分(acute physiologyand chronic health evaluationⅡ，APACHEⅡ)、Ranson評(píng)分、AP嚴(yán)重程度床旁指數(shù)評(píng)分(bedside index for severity

3、in acute pancreatitis，BISAP)與CTSI評(píng)分等，臨床相關(guān)的指標(biāo)如身體質(zhì)量指數(shù)(body mass index，BMI)、急性液體積聚(acute fluid collection，AFC)等，影像學(xué)指標(biāo)如B型多普勒超聲、CT等，實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)指標(biāo)如血清中的C反應(yīng)蛋白(C-ReactiveProtein，CRP)、髓樣細(xì)胞表達(dá)的激發(fā)受體-1(triggeringreceptor expressed on myelo

4、id cells-1，TREM-1)、腫瘤壞死因子家族的B細(xì)胞激活因子(B-cell activating factor of TNF family，BAFF)、降鈣素原(procalcitonin，PCT)等。他們?cè)趯?duì)重癥急性胰腺炎預(yù)測(cè)有各自的優(yōu)勢(shì)和局限性。microRNA是一種長(zhǎng)度為20-22nt的非編碼RNA，它是由一段具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的單鏈RNA前體經(jīng)Drosha酶和Dicer酶的剪切后生成。miRNA參與了機(jī)體許多生理過(guò)程，目前大

5、量的研究發(fā)現(xiàn)，microRNA與包括急性胰腺炎在內(nèi)的許多炎癥有密切關(guān)系。本研究探索miR-21、miR-146a、miR-26a、miR-200a、miR-10b在大鼠急性胰腺炎早期的變化及其臨床意義。
　　方法:采用SPF級(jí)SD大鼠36只隨機(jī)分成3組，出血壞死性胰腺炎組、水腫性胰腺炎組和對(duì)照組。出血壞死性胰腺炎組和水腫性胰腺炎組模型通過(guò)開腹胰膽管逆行注射5％和1％的牛黃膽酸鈉制備，對(duì)照組行開腹手術(shù)，輕微翻動(dòng)胰腺后關(guān)腹。在造模后1

6、2小時(shí)、24小時(shí)分別檢測(cè)三組大鼠血漿中miR-21、miR-146a、miR-26a、miR-200a、miR-10b的變化，同時(shí)檢測(cè)血清中淀粉酶、脂肪酶、IL-1和IL-6的變化。造模后12小時(shí)、24小時(shí)分別取3組大鼠胰腺組織做HE染色并做胰腺病理評(píng)分。用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)胰腺中的PTEN的表達(dá)，用ELISA法檢測(cè)血清中的NF-KB的含量。
　　結(jié)果:在相同的時(shí)相點(diǎn)出血壞死性組和水腫性胰腺炎組大鼠的血清淀粉酶、脂肪酶、IL-1、

7、IL-6水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，血清淀粉酶在出血壞死性胰腺炎組和水腫性胰腺炎組差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，出血壞死性胰腺炎組血清脂肪酶、IL-1、IL-6高于水腫性胰腺炎組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);在相同的時(shí)相點(diǎn)胰腺病理評(píng)分出血壞死性胰腺炎組高于水腫性胰腺炎組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而水腫性胰腺炎組和對(duì)照組胰腺病理評(píng)分差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;miR-21在出血壞死性胰腺炎組表達(dá)明顯低于水腫性胰

8、腺炎組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，miR-21在水腫性胰腺炎組和對(duì)照組表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，miR-146a、miR-26a、miR-200a、miR-10b、miR-21在出血性胰腺炎組、水腫性胰腺炎和對(duì)照組間表達(dá)差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。在相同的時(shí)相點(diǎn)，PTEN表達(dá)在出血性胰腺炎組高于水腫性胰腺炎組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，PTEN表達(dá)在水腫性胰腺炎組和對(duì)照組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;血清中NF-KB含量在出血