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1、目的:建立一種理想的重癥急性胰腺炎(SAP)動(dòng)物模型。觀(guān)察SAP大鼠脾臟組織中核因子kB(nuclear factor-kB)的表達(dá),探討脾臟在SAP的發(fā)病中的作用。 方法:1)SD大鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組(SAP)(n=24)和假手術(shù)組(n=24),細(xì)針逆行胰膽管注射4%牛磺膽酸鈉建立SAP模型,采集腹水,3,6,12小時(shí)采血測(cè)定血清淀粉酶,取胰腺體部標(biāo)本予4%甲醛固定后制作石蠟切片HE染色進(jìn)行光鏡病理組織學(xué)觀(guān)察.胰腺組織根據(jù)Ron
2、gine標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行病理嚴(yán)重度評(píng)分。2)96只SD大鼠隨機(jī)分成4組:假手術(shù)組,脾切除組,SAP組,脾切除+SAP組。制模后3,6,12h分批處死動(dòng)物,取血樣和標(biāo)本待以下檢測(cè):HE染色光鏡下觀(guān)察胰腺組織病理改變并進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分。用酶聯(lián)免疫吸附分析法(ELISA)進(jìn)行血清TNF-α測(cè)定。采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)大鼠脾臟NFkBp65活化表達(dá)水平。 結(jié)果:1)SAP組3,6,12小時(shí)觀(guān)察胰腺組織具有不同程度的出血壞死改變,其胰腺病理學(xué)評(píng)分
3、、血清淀粉酶水平、腹水含量均較假手術(shù)組明顯升高,差異有顯著性。2)血清TNF-α濃度測(cè)定結(jié)果:制模后SAP組和脾切+SAP組在不同時(shí)點(diǎn)血清的濃度均比對(duì)照組明顯升高(P<0.05),脾切除+SAP組在6,12hTNF-α濃度明顯低于SAP組,差異有顯著性。SAP組在不同時(shí)點(diǎn)之間比較,差異均有顯著性,表現(xiàn)為隨時(shí)間延長(zhǎng)而升高。脾切+SAP組3,6h及6,12h比較,差異無(wú)顯著性。脾切除+AP組6h,12h胰腺病理學(xué)評(píng)分均低于AP組(6h 7.
4、83±0.753,vs 9.67±1.211 12h 9.67±0.816,vs 13±0.894)(P<0.01);AP大鼠模型中脾臟NFkBp65活化陽(yáng)性表達(dá)3h(46.967±1.148)即明顯,6h(56.333±1.588)最強(qiáng),12h(36.900±0.756)表達(dá)減弱,與假手術(shù)組相應(yīng)時(shí)點(diǎn)差異均有顯著性。 結(jié)論:制作穩(wěn)定的操作平臺(tái),逆行膽胰管注射4%?;悄懰徕c誘導(dǎo)的SAP大鼠模型是可成功地誘導(dǎo)重癥急性胰腺炎,具有創(chuàng)傷
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