阿奇霉素對哮喘大鼠氣道重塑及HIF--1a、TGF--β1表達的影響.pdf

1、目的：觀察HIF-1a、TGF-β1在哮喘大鼠模型中的表達情況及其與哮喘氣道重塑的關系,探討阿奇霉素對哮喘大鼠氣道重塑的影響及其可能機制。
　　方法：將32只雄性Sprauge-Dawley(SD)大鼠隨機分為正常對照組(A組)、哮喘組(B組)、哮喘+阿奇霉素組(C組)、哮喘+地塞米松組(D組),每組8只。哮喘組：在第1天和第8天腹腔注射1ml卵清蛋白和氫氧化鋁混合液致敏,第14天B組大鼠予以1％戊巴比妥鈉40mg·kg-1腹腔注

2、射麻醉后,每鼻每日滴入2mg·ml-1OVA40ul激發(fā),連續(xù)28天,以大鼠出現(xiàn)呼吸急促、打噴嚏、口唇發(fā)紺、身體抽搐、喘氣、煩躁不安等癥狀為激發(fā)成功。哮喘+阿奇霉素組：前期制備和哮喘組相同,從滴鼻激發(fā)開始,C組大鼠每日于滴鼻激發(fā)前30min予以阿奇霉素注射液50mg·kg-1腹腔注射,每天注射阿奇霉素注射液1次,共28天。哮喘+地塞米松組：前期制備和哮喘組相同,從滴鼻激發(fā)開始,D組大鼠每日于滴鼻激發(fā)前30min使用地塞米松注射液0.5m

3、g·kg-1腹腔注射,每天1次,共28天。正常對照組：A組大鼠第1天和第8天腹腔注射生理鹽水1ml,第14天在腹腔注射生理鹽水1ml后予以等量生理鹽水滴鼻,每天1次,共28天。各組大鼠于末次激發(fā)后24小時內(nèi)麻醉,保存右肺組織行蘇木素-伊紅(HE)染色,觀察各組大鼠肺組織的病理變化,使用醫(yī)學圖像分析系統(tǒng)測量大鼠氣道重塑參數(shù),采用免疫組織化學技術檢測大鼠肺組織HIF-1a及TGF-β1的表達情況,ELISA檢測大鼠血清HIF-1a、TGF-

4、β1的含量。
　　結(jié)果：1、一般情況：實驗開始時各組大鼠動作反應迅速,喜嬉鬧,食欲可。在實驗整個過程中,B組大鼠出現(xiàn)食欲不佳、體重逐漸下降,并在激發(fā)后立即出現(xiàn)躁動不安、打噴嚏、呼吸急促、喘息等癥狀,部分大鼠可聞及喘鳴音。C、D組大鼠也出現(xiàn)食欲不佳、體重逐漸下降,激發(fā)后出現(xiàn)躁動不安、打噴嚏、呼吸急促等癥狀,但無喘息。在激發(fā)第14天,C組7號大鼠在麻醉激發(fā)后死亡,考慮是麻醉過量及哮喘激發(fā)所致。A組大鼠在實驗過程中體重增加,行為和食欲均

5、未見明顯異常,未出現(xiàn)喘息、打噴嚏等癥狀。2、各組大鼠肺組織HE染色結(jié)果：A組各級支氣管結(jié)構(gòu)正常,支氣管黏膜上皮連續(xù)、完整,未見黏膜脫落及炎性細胞浸潤。與A組相比,B組可見黏膜上皮壞死脫落,支氣管管腔內(nèi)可見黏液栓,杯狀細胞增多,黏液腺腺體增生,支氣管管壁增厚,平滑肌細胞增生肥大,氣道壁及肺組織內(nèi)可見大量炎性細胞浸潤,主要為淋巴細胞、嗜酸性粒細胞。與A組相比,C、D組也可見黏膜上皮壞死脫落,支氣管管腔內(nèi)可見黏液栓,杯狀細胞增多,黏液腺腺體增

6、生,支氣管管壁增厚,平滑肌細胞增生肥大,氣道壁及肺組織內(nèi)大量炎性細胞浸潤,但較B組減輕。3、肺組織氣道重塑參數(shù)結(jié)果：B組支氣管壁厚度、平滑肌厚度均較A組升高(P＜0.05),C、D組與A組比較未見明顯異常(P＞0.05),C、D組支氣管壁厚度低于B組(P＜0.05),平滑肌厚度與B組比較未見明顯異常(P＞0.05)。4、免疫組織化學檢測肺組織HIF-1a、TGF-β1的表達：B、C、D各組大鼠的肺組織HIF-1a的表達較A組顯著增加(P

7、＜0.05),B、C、D三組之間比較未見明顯變化(P＞0.05);B組大鼠肺組織TGF-β1的表達較A組明顯增高(P＜0.05),C、D組肺組織TGF-β1的表達較B組下降(P＜0.05),C、D組肺組織TGF-β1的表達與A組比較未見明顯差異(P＞0.05)。5、ELISA檢測血清HIF-1a、TGF-β1的含量：B、C、D組血清HIF-1a的含量較A組顯著增高(P＜0.05),B、C、D三組之間比較未見明顯變化(P＞0.05);B組

8、血清TGF-β1的含量較A組明顯升高(P＜0.05),C、D組血清TGF-1的含量較B組降低(P＜0.05),C、D組血清TGF-β1的含量與A組比較未見明顯差異(P＞0.05)。6、HIF-1a、TGF-β1、支氣管壁厚度、平滑肌厚度相關性分析：大鼠肺組織HIF-1a與TGF-β1之間存在正相關(r=0.426,P＜0.05),大鼠血清HIF-1a與TGF-β1之間存在正相關(r=0.608,P＜0.01),大鼠肺組織HIF-1a與支

9、氣管壁厚度之間存在正相關(r=0.676,P＜0.01),大鼠肺組織TGF-β1與支氣管壁厚度之間存在正相關(r=0.359,P＜0.05),大鼠血清TGF-β1與支氣管壁厚度之間存在正相關(r=0.561,P＜0.01),大鼠血清TGF-β1與平滑肌厚度之間存在正相關(r=0.433,P＜0.05),大鼠支氣管壁厚度與平滑肌厚度之間存在正相關(r=0.793,P＜0.01)。
　　結(jié)論：1、哮喘大鼠HIF-1a、TGF-β1表達