GPR54基因C-816T和T-754C的多態(tài)性與牛性成熟關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、GPR54基因是牛性成熟狀的重要候選基因之一，本文選擇42頭安徽本地黃牛、44頭西門塔爾牛及其雜交育種群116頭作為試驗群體，分析牛GPR54基因5’調(diào)控區(qū)的SNPs以及不同基因型啟動子的啟動效率和牛性成熟狀之間的關(guān)聯(lián)性。試驗提取牛血液基因組后，通過測序鑒別SNP位點，雙熒光素酶報告基因驗證其SNP位點對啟動子效率的影響。結(jié)果表明：
　　1.GPR54基因的啟動子區(qū)GPR973序列存在兩個SNPs位點，分別是距離CDS起點上游第8

2、16位和754位：C-816T和T-754C，西門塔爾牛和安徽地方黃牛分別只有1種基因型，西門塔爾牛的基因型全部為CCTT，安徽地方黃牛的基因型全部為TTCC，分析其單倍型結(jié)果顯示連鎖不平衡。
　　2.C-816T突變位點附近存在TCF-1和AP-3(2)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點，T-754C附近及其本身存在TFIID、NF-1、CAC-binding_pro、TCF-1轉(zhuǎn)錄因子以及F位點等。從C-816T到T-754C形成一個以TCF-

3、1開頭結(jié)尾的復(fù)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合區(qū)域，其中還包含一個TFIID結(jié)合的G/TATAAA盒。經(jīng)過預(yù)測，本目的片段含有一個從-878bp至-638bp的啟動子區(qū)域。
　　3.通過雙熒光素酶報告基因驗證了西門塔爾牛和安徽地方黃牛不同GPR973基因型的啟動子效率，報告基因驗證兩種單倍型的啟動子存在明顯差異，其中-816CT-754啟動子的效率要比-816TC-754提高34.31％（p<0.01）。
　　4.通過對不同品種牛GPR54進(jìn)