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文檔簡介
1、目的:本實驗基于課題前期研究,進一步探討以“補腎調(diào)沖”立法的通脈大生片對腎虛排卵障礙模型大鼠卵巢促性腺激素受體干預(yù)的分子機制,并初步探究其對模型大鼠血液流變學(xué)的影響,以評價“補腎調(diào)沖”法對卵巢局部環(huán)境的干預(yù)作用,為該法的臨床應(yīng)用提供客觀依據(jù)。
方法:依據(jù)俞瑾丙酸睪酮法,用9日齡SD雌性大鼠復(fù)制腎虛排卵障礙動物模型,以大鼠一般情況與陰道脫落細胞涂片結(jié)果為造模成功標準。將造模成功大鼠按隨機數(shù)字表法分組:模型組,通脈大生片高、中、低
2、劑量組(通高組、通中組、通低組),右歸丸組,來曲唑組與正常組共七組。連續(xù)藥物干預(yù)5周后(即大鼠80日齡時)股動脈采血,檢測血液流變學(xué)指標、血清TGF-β1含量;處死后開腹速取卵巢并稱濕重,即刻置于液氮中,-70℃保存?zhèn)錅yFSHR mRNA、LHR mRNA(Real-time PCR法)。
結(jié)果:1.模型組體重變化率較正常組降低(P<0.05)。與模型組比較,通高、來曲唑組體重變化率均明顯升高(P<0.01);通中、右歸丸組體
3、重變化率也有升高(P<0.05);通低組無明顯改變(P>0.05)。通脈各劑量組比較,通高組體重變化率升高最明顯,與正常組無差異(P>0.05)。來曲唑組體重增長明顯高于正常組(P<0.01)。
2.模型組大鼠卵巢指數(shù)較正常組降低(P<0.01)。與模型組比較,通高、中、右歸丸、來曲唑組的卵巢指數(shù)均明顯升高(P<0.01),通低組無明顯改變(P>0.05)。各藥物組中,來曲唑組卵巢指數(shù)升高最為明顯。
3.模型組FSH
4、R mRNA表達較正常組降低(P<0.01)。與模型組比較,通高、來曲唑組FSHR mRNA升高(P<0.01);通中、低、右歸丸組也有所升高(P<0.05)。通脈各劑量組中,以通高組效果最優(yōu)。
4.模型組LHR mRNA表達較正常組降低(P<0.01)。與模型組比較,通高、通中、來曲唑、右歸丸組LHR mRNA均升高(P<0.01);通低組也有所升高(P<0.05)。通脈各劑量組中,以通高組效果最優(yōu)。
5.模型組血
5、清 TGF-β1量較正常組降低(P<0.01)。與模型組比較,來曲唑組TGF-β1量明顯升高(P<0.01),通高、右歸丸組血清 TGF-β1量也有所升高(P<0.05),通中、低組TGF-β1雖有升高,但無明顯差異(P>0.05)。通脈各劑量組中,通高組TGF-β1水平最優(yōu)。
6.FSHR mRNA表達量與TGF-β1呈正相直線相關(guān)關(guān)系(r=0.721,P<0.01);LHR mRNA表達量與TGF-β1亦呈正相直線相關(guān)關(guān)系
6、(r=0.876,P<0.01)。
7.①與正常組比較,模型組全血粘度高切變率升高(P<0.05),紅細胞變形指數(shù)降低(P<0.05),其他指標無明顯變化(P>0.05)。②與模型組比較,通高組的全血粘度低切變率明顯降低(P<0.01),全血粘度高中切變率、血漿粘度及紅細胞變形指數(shù)均不同程度改善(P<0.05),其他指標無明顯改變(P>0.05);通中組全血粘度高中切變率和血漿粘度均降低(P<0.05);通低、右歸丸、來曲唑組
7、血液流變學(xué)各項指標均無明顯變化(P>0.05);③通脈各劑量組中,通高組血液流變學(xué)指標優(yōu)于通中、通低組。
結(jié)論:以“補腎調(diào)沖”立法的通脈大生片促卵泡發(fā)育和誘發(fā)排卵的作用機制是通過以下幾個環(huán)節(jié)和靶點實現(xiàn)的:
1.通脈大生片可通過改善模型大鼠體重和卵巢指數(shù),來優(yōu)化模型大鼠生長與生殖不良狀態(tài),利于卵泡發(fā)育。
2.腎虛排卵障礙模型大鼠存在促性腺激素受體(FSHR、LHR)mRNA的表達失衡,通脈大生片可上調(diào)其表達,
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