非病毒基因載體生物相容性研究.pdf

1、在過(guò)去二十多年間，基于基因遞送的臨床實(shí)驗(yàn)已經(jīng)被廣泛研究并用于治療或者防御各種疾病。但是，載體在細(xì)胞內(nèi)外的遞送障礙使得臨床實(shí)驗(yàn)的成功率很低。納米粒子和蛋白質(zhì)的相互作用是基因遞送的首要障礙。藥物遞送系統(tǒng)和血液蛋白的結(jié)合被認(rèn)為是載體遞送至關(guān)重要的步驟，能夠決定大部分的納米粒子的生物分布、效率和毒性。
　　本研究我們首先利用膠束/前驅(qū)體共模板組裝策略制備了分子水平有機(jī)-無(wú)機(jī)雜交的硫醚橋接的介孔有機(jī)硅納米粒子（TB-MONs），得到的納米粒

2、子孔徑較大且粒徑在30 nm左右，適宜于直接靶向細(xì)胞核。3-巰基丙基三甲氧基硅烷（MPTES）通過(guò)后接枝的方法引入到TB-MONs表面以便后續(xù)的功能化。含巰基的TB-MONs作為引發(fā)劑，在溶液中通過(guò)巰基-二硫交換的聚合在粒子表面引入細(xì)胞滲透的聚硫醚（CPD）。研究了改性前后的硫醚橋接的介孔有機(jī)硅納米粒子的溶血效應(yīng)和蛋白吸附行為。結(jié)果表明制備的TB-MONs相對(duì)于傳統(tǒng)的MSNs蛋白吸附和溶血百分比都有所降低，且粒子表面引入CPD對(duì)粒子的蛋

3、白吸附和溶血效應(yīng)都影響不大。
　　為了闡明結(jié)構(gòu)對(duì)和蛋白相互作用的影響，我們研究了兩種具有相同的分子量但是結(jié)構(gòu)不同的聚陽(yáng)離子及其復(fù)合體系和BSA的相互作用，這兩種聚陽(yáng)離子是接枝聚合物——聚（N-乙烯吡咯烷酮）-g-聚（2-甲基丙烯酸二甲氨基乙酯）（PVP-g-PDMAEMA,也就是 PgP）和嵌段聚合物——聚（N-乙烯吡咯烷酮-b-聚（2-甲基丙烯酸二甲氨基乙酯）（PVP-g-PDMAEMA,也就是PgP）。我們利用熒光光譜來(lái)確定聚

4、陽(yáng)離子和BSA的靜電結(jié)合常數(shù)和結(jié)合位點(diǎn)。PgP和BSA相互作用的結(jié)合常數(shù)為8.3×104 M-1，這個(gè)值要比PbP（4.1×104 M-1）的大，說(shuō)明PgP和 BSA具有較強(qiáng)的相互作用。這個(gè)結(jié)論同時(shí)可以由 PbP和 PgP的結(jié)合位點(diǎn)值得到支持（(0.3 vs1.1)。利用表面等離子體共振傳感器（SPR）來(lái)研究聚陽(yáng)離子及其復(fù)合體系和BSA的非特異性相互作用，根據(jù)SPR實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，兩種聚陽(yáng)離子和BSA的相互作用都隨著濃度的增加而增加，且其復(fù)