絲瓜褐變分級與總酚及相關(guān)酶活性分析.pdf

1、絲瓜是國內(nèi)外廣泛栽培的蔬菜種類之一，是我國大面積栽培的主要瓜類。目前絲瓜果肉褐變是絲瓜采后品質(zhì)劣變最為突出的問題，嚴(yán)重影響絲瓜產(chǎn)品的商品價值，造成巨大經(jīng)濟(jì)損。酶和酚類物質(zhì)是導(dǎo)致褐變發(fā)生的重要影響因素和必備條件之一，為了解絲瓜總酚含量及相關(guān)酶活性之間的關(guān)系，本試驗以38個絲瓜種質(zhì)資源為試材，初步建立了絲瓜褐變度概率分級，及總酚與褐變度的線性回歸曲線，并從中篩選出P-4（褐變）與P-6（耐褐變），以這兩種褐變程度不同的絲瓜種質(zhì)資源為試材，研

2、究絲瓜發(fā)育過程及采后保鮮過程中總酚含量及相關(guān)酶［多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶（POD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）、過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD)］活性的動態(tài)變化，為防止絲瓜褐變提供理論依據(jù)。取得以下主要結(jié)果：
　　1.優(yōu)化了絲瓜總酚提取和測定體系：（1）提取優(yōu)化結(jié)果：乙醇濃度為80％，料液比為1:10，超聲波溫度為40℃，超聲波時間為30 min；（2）測定優(yōu)化結(jié)果：測定波長為750 nm，反應(yīng)時間為60 mi

3、n，反應(yīng)溫度為30℃，0.5 mol/L Na2CO3體積為3 mL，0.5 mol/L福林-酚體積為1.5 mL。
　　2.絲瓜褐變相關(guān)酶酶學(xué)特性的研究，具體結(jié)果如下：（1）PPO最適反應(yīng)體系：以鄰苯二酚為底物，該酶的最適反應(yīng)溫度為35℃，最適pH為6.0，反應(yīng)時間不宜超過2.5 min，Km值為0.05 mol/L，最適酶液體積為0.15 mL；（2）POD最適反應(yīng)體系：以愈創(chuàng)木酚為底物，該酶的反應(yīng)時間不宜超過3 min，Km

4、值為0.013 mol/L，該酶的最適溫度為40℃，最適酶液體積為0.12 mL或0.16 mL，最適pH為5.5；（3）PAL最適反應(yīng)體系：以L-苯丙氨酸為底物，最適底物濃度為0.02 mol/L，Km值為0.0835 mol/L，最適溫度為40℃，最適pH為8.4，最適酶液體積為1.4 mL；（4）SOD最適反應(yīng)體系：以 NBT為底物，最適底物濃度為0.08 mol/L，Km值為0.2079 mol/L，最適溫度為40℃，最適pH為

5、7.8，最適酶液體積為0.14 mL；（5）CAT最適反應(yīng)體系：以H2O2為底物，最適底物濃度為0.33 mol/L H2O2，Km值為0.1818 mol/L，最適溫度為40℃，最適pH為7.8，最適酶液體積為0.1 mL。
　　3.絲瓜褐變度的概率分級：38個普通絲瓜品種（系）的果肉褐變度變化范圍為2.17～9.60，平均褐變度為6.211，變異系數(shù)為29.77%。經(jīng)過K-S正態(tài)性檢驗，褐變度符合正態(tài)分布，采用（X-1.281

6、8S）、（X-0.5246S）、（X+0.5246S）、（X+1.2818S）4個點對其進(jìn)行概率分級，提出絲瓜褐變度的分級標(biāo)準(zhǔn)。將絲瓜褐變度劃分為5級：1級：<3.84（極低）占10.53%；2級：3.84～5.24（低）占18.42%；3級：5.24～7.18（中）占36.84%；4級：7.18～8.58（高）占23.68%；5級：>8.58（極高）占10.53%。篩選出褐變程度不同的兩個絲瓜種質(zhì)資源 P-4（褐變）與P-6（耐褐變）

7、作為后續(xù)試驗材料。
　　4.絲瓜總酚與褐變度線性回歸分析：測定了38個絲瓜種質(zhì)資源的總酚和褐變度，通過線性回歸分析，明確總酚與褐變度之間存在顯著的線性關(guān)系，建立了線性回歸方程y（褐變度）=3.559 x（總酚）-2.837。
　　5.絲瓜總酚與若干酶活性的相關(guān)性分析：（1）生育期：褐變度高（P-4）的品種（系）與褐變度低（P-6）的品種（系）總酚含量與 PPO、POD、CAT、SOD活性差異顯著，與PAL差異不顯著。褐變度高

8、的PPO、PAL活性高，POD、SOD、CAT活性低。相關(guān)性分析顯示，褐變度高的總酚含量與PPO、PAL活性極顯著正相關(guān)，與POD活性顯著正相關(guān)。褐變度低的總酚含量與PAL活性呈極顯著正相關(guān)，與 PPO活性呈顯著正相關(guān)。由此可知，發(fā)育期的絲瓜褐變主要是由總酚與PPO、PAL、POD活性這幾個變量共同影響絲瓜的褐變。
　　（2）常溫（25℃）下鮮切絲瓜放置時期：褐變度高（P-4）與褐變度低（P-6）的總酚含量與若干酶活性顯著差異。P