利拉魯肽對低脂聯(lián)素血癥ApoE---小鼠糖脂代謝紊亂干預(yù)機制的研究.pdf

1、目的:將構(gòu)建的脂聯(lián)素RNAi腺病毒載體導(dǎo)入高脂喂養(yǎng)的ApoE-/-小鼠,建立一種具有遺傳和環(huán)境因素共同作用的胰島素抵抗(IR)模型;觀察低脂聯(lián)素血癥對膽固醇及糖脂代謝相關(guān)基因表達的影響,并探討在利拉魯肽干預(yù)下胰島素抵抗的作用機制。
　　 方法:健康雄性ApoE-/-小鼠32只,鼠齡8周,隨機分為高脂喂養(yǎng)組(HF,n=6)、空載腺病毒組(GF,n=8)、脂聯(lián)素RNAi腺病毒組(ADI,n=9)以及聯(lián)合注射利拉魯肽和脂聯(lián)素RNAi腺

2、病毒組(HEA,n=9)。均給予高脂飼料喂養(yǎng)16周。HEA組于第9周時腹腔注射利拉魯肽(1mg·kg-1,Bid),共8周。于14周末給予GF和HEA、ADI組小鼠靜脈注射pad-GFP和pAd-Acrp30(1×109/100μl)。取血漿、肝臟和脂肪組織樣本。采用酶法及放射免疫分析方法測定血漿糖脂代謝一般生化指標和胰島素的變化;ELISA法檢測血漿脂聯(lián)素水平;采用實時熒光定量PCR和Dot-blot方法檢測肝臟和脂肪組織膽固醇代謝、

3、糖脂代謝相關(guān)基因mRNA和蛋白表達的變化。
　　 結(jié)果;脂聯(lián)素RNAi腺病毒組(ADI)血漿FFA、TC、TG、PIns和LDL-C水平顯著高于對照組(HF和GF,P＜0.05)和利拉魯肽干預(yù)組(HEA,P＜0.01);HEA組體重和空腹血糖(FBG)顯著低于對照組和ADI組(P＜0.05),而HDL-C則明顯高于ADI組(P＜0.05)。ADI組肝臟PPARα、INSIG2和LDLr mRNA表達水平較對照組和HEA組均顯著降

4、低(P＜0.01和P＜0.05);HEA組肝組織HMGCR和SREBP-2mRNA表達水平較對照組和HEA組均顯著升高(P＜0.01和P＜0.05)。ADI組肝臟GLUT-1 mRNA的表達量顯著低于對照組和HEA組(p＜0.01),而PEPCK的表達量則顯著高于上述三組(p＜0.05);ADI組脂肪組織PPARγ和HSL mRNA的表達量均顯著低于對照組和HEA組(p＜0.01),FAS的表達量則顯著高于上述三組(p＜0.01);HE

5、A組ACCmRNA的表達量顯著低于ADI組,SCD-1的表達量著顯低于對照組和ADI組(p＜0.01)。脂肪組織ADI組脂聯(lián)素和Visfatin mRNA表達水平顯著低于對照組(P＜0.05和P＜0.01),注射利拉魯肽后脂聯(lián)素表達水平與ADI組相比顯著增高(P＜0.01)。ADI組血漿和脂肪組織Visfatin蛋白和血漿脂聯(lián)素水平顯著低于對照組和HEA組(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:脂聯(lián)素基因抑制明顯加重了小鼠體內(nèi)糖脂代謝紊