MIF蛋白表達(dá)水平及MIF基因多態(tài)性同結(jié)核病關(guān)系的研究.pdf

1、研究背景及目的：
　　巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(Macrophage Migration Inhibitory Factor，MIF)作為一種促炎性細(xì)胞因子，在免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。體外研究表明，MIF可以抑制致病性結(jié)核分枝桿菌的生長(zhǎng)繁殖。結(jié)核分枝桿菌主要感染體內(nèi)的巨噬細(xì)胞，MIF能夠抑制巨噬細(xì)胞游走，促進(jìn)感染部位巨噬細(xì)胞的聚集、浸潤(rùn)、增生、活化及分泌一些細(xì)胞因子從而參與免疫反應(yīng)。因而，MIF在結(jié)核病的發(fā)生發(fā)展中起了不

2、容忽視的作用。本課題通過(guò)檢測(cè)結(jié)核病人和對(duì)照組人群外周血清中MIF蛋白的表達(dá)水平，并對(duì)MIF基因啟動(dòng)子多態(tài)性位點(diǎn)-173G/C和微衛(wèi)星多態(tài)性位點(diǎn)-794CATT5-8進(jìn)行分析，從而討論MIF與結(jié)核病易感性的關(guān)系。
　　研究方法：
　　(1)收集結(jié)核患者及正常對(duì)照組人群外周血，凝固后分離血清；提取所有結(jié)核病人和正常對(duì)照人群外周血基因組DNA。
　　(2)通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)法檢測(cè)血清中MIF的表達(dá)水平，并對(duì)其

3、表的水平的差異進(jìn)行分析。
　　(3)用聚合酶鏈反應(yīng)。限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RELP-PCR)的方法檢測(cè)MIF基因啟動(dòng)子-173G/C位點(diǎn)多態(tài)性，統(tǒng)計(jì)其基因型和等位基因的分布頻率，分析其基因多態(tài)性與西南地區(qū)結(jié)核病易感性的關(guān)系。
　　(4)通過(guò)基因測(cè)序技術(shù)分析結(jié)核病人及健康人群的MIF基因-794CATT5-8微衛(wèi)星多態(tài)性進(jìn)行檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)其基因型和等位基因的分布頻率，分析其基因多態(tài)性與西南地區(qū)結(jié)核病易感性的關(guān)系。
　　結(jié)果：

4、
　　(1)結(jié)核病人組血清MIF表達(dá)水平為(705.21±67.98)pg/ml，顯著高于對(duì)照組(355.31+57.29)pg/ml(P<0.01)，表達(dá)水平平均升高1倍左右。
　　(2)結(jié)核病人組MIF-173G/C多態(tài)性位點(diǎn)G/G純合子、G/C雜合子、C/C純合子基因型頻率分別是50.7％、34.4％和14.9％；G、C等位基因頻率分別是67.9％和32.1％。健康對(duì)照組G/G純合子、G/C雜合子、C/C純合子基因型頻

5、率分別是68.8％、24.9％和6.5％；G、C等位基因頻率分別是81.O％和19.0％。兩組基因型及等位基因頻率的分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　(3)結(jié)核病人組MIF基因啟動(dòng)子微衛(wèi)星多態(tài)性位點(diǎn)-794區(qū)CATT重復(fù)序列拷貝數(shù)所占比例分別是5/5(7.9％)，5/6(13.5％)，5/7(10.7％)，5/8(1.4％)，6/6(21.9％)，6/7(24.7％)，6/8(0.5％)，7/7(10.7％)，7/8(

6、8.8％)；健康對(duì)照組分別是5/5(12.7％)，5/6(18.8％)，5/7(13.1％)，5/8(0.8％)，6/6(23.3％)，6/7(24.9％)，7/7(3.7％)，7/8(2.8％)。結(jié)核病人組MIF-794等位基因CATT5、CATT6、CATT7和CATT8所占比例分別是20.7％、41.2％、32.8％和5.3％；對(duì)照組則分別是29.0％、45.1％、24.1％和1.8％?；蛐虲ATT7/7和CATT7/8，等位基

7、因CATT7和CATT8的分布具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
　　結(jié)論：
　　(1)結(jié)核病人外周血清中MIF表達(dá)水平較健康對(duì)照組升高，提示MIF參與結(jié)核病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
　　(2)在西南地區(qū)人群中MIF基因啟動(dòng)子單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)-173與結(jié)核病易感性相關(guān)。等位基因C可能是增加結(jié)核病易感性的因素之一。
　　(3)在西南地區(qū)人群中MIF基因啟動(dòng)子微衛(wèi)星多態(tài)性位點(diǎn)-794與結(jié)核病易感性相關(guān)。等位基因CATT7和C