槲皮素對(duì)肉雞P-gp表達(dá)和功能以及肉雞口服恩諾沙星藥動(dòng)學(xué)的影響.pdf

1、轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的改變是導(dǎo)致臨床上產(chǎn)生藥物相互作用的重要原因之一，其會(huì)影響合用藥物的體內(nèi)濃度以及代謝過程，從而對(duì)藥物的有效性及安全性產(chǎn)生不良影響。P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族成員之一，是一種能量依賴型的藥物外排泵，參與外源性和內(nèi)源性物質(zhì)的吸收和排泄。異源質(zhì)受體（chicken xenobiotic-sensing orphan nuclear receptor，CXR）是一種存在于禽類并與核受體超

2、家族成員具有相似典型結(jié)構(gòu)與功能的核受體，參與P-gp表達(dá)的轉(zhuǎn)錄與調(diào)控，在機(jī)體異源性/內(nèi)源性物質(zhì)的代謝及排泄過程中起著重要調(diào)節(jié)作用。槲皮素(Quercetin，Quer)是一種天然且具有多種生理活性的黃酮類化合物，具有抗氧化、抗炎、抗過敏等多方面的藥理作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)槲皮素對(duì)部分藥物的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程具有調(diào)節(jié)作用，推測(cè)與槲皮素影響藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白P-gp及CXR的表達(dá)有關(guān)，本論文以此為切入點(diǎn)，探究了不同劑量的槲皮素（15和60 mg/kg）

3、對(duì)健康肉雞肝臟、腎臟及腸組織mdr1（P-gp編碼基因）及CXR mRNA表達(dá)、口服恩諾沙星藥動(dòng)學(xué)及腸道P-gp外排功能的影響，為闡明槲皮素是否會(huì)介導(dǎo)藥物間的相互作用提供參考。
　　首先，本實(shí)驗(yàn)通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)來探究槲皮素不同劑量(15和60 mg/kg)與灌服不同時(shí)間（1，5和10天）后對(duì)健康肉雞mdr1及CXR mRNA表達(dá)的影響。與空白對(duì)照組肉雞相比，槲皮素（15和60 mg/kg）在處理1天、5天、10天后可以極

4、顯著誘導(dǎo)肝臟組織中mdr1 mRNA的表達(dá)（P＜0.01）;槲皮素（15和60 mg/kg）連續(xù)處理5、10天也可顯著誘導(dǎo)腎臟mdr1 mRNA表達(dá)（P＜0.05），除15 mg/kg槲皮素處理1天可極顯著抑制十二指腸組織中mdr1mRNA的表達(dá)外，其余不同劑量的槲皮素(15和60 mg/kg)對(duì)十二指腸及空腸組織中mdr1 mRNA表達(dá)均呈現(xiàn)了不同程度的誘導(dǎo)作用，而在回腸組織中其誘導(dǎo)作用不明顯。CXR mRNA的檢測(cè)結(jié)果顯示:與對(duì)照組

5、相比較，不同劑量的槲皮素（15乖60 mg/kg）在連續(xù)處理10天后對(duì)肝臟、腎臟及腸道組織中CXR mRNA的表達(dá)均有較強(qiáng)的抑制作用(P＜0.05);在空腸組織中，槲皮素(15和60 mg/kg)連續(xù)處理1、5、10天均可對(duì)空腸組織中CXR mRNA的表達(dá)有較強(qiáng)的抑制作用。而在十二指腸及回腸組織中其表達(dá)也受到了不同程度的抑制。結(jié)果提示槲皮素對(duì)mdr1 mRNA表達(dá)的作用可能主要不是通過CXR途徑來調(diào)控的。
　　基于槲皮素對(duì)mdr1

6、 mRNA表達(dá)的影響，本論文進(jìn)一步探討了不同劑量的槲皮素對(duì)健康肉雞口服恩諾沙星藥動(dòng)學(xué)的影響。實(shí)驗(yàn)采用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)了恩諾沙星在血漿中的濃度變化。結(jié)果顯示，空白對(duì)照組在肉雞體內(nèi)的達(dá)峰時(shí)間Tmax為2.75±0.25 h;血漿中峰濃度Cmax為2.67±0.30μg/mL，藥時(shí)曲線下面積AUClast為23.75±2.03μg·h/mL;清除率CL為413.17±32.80mL/h/kg;表觀分布容積V為2.83±0.60

7、mL/kg。經(jīng)槲皮素(15 mg/kg、60 mg/kg)處理一天后其達(dá)峰時(shí)間與對(duì)照組相比均有提前;其中槲皮素高劑量組(60mg/kg)藥時(shí)曲線下面積AUClast(17.35±1.04μg·h/mL，P＜0.05)以及峰濃度Cmax（1.79±0.13μg/mL，P＜0.05）與對(duì)照組相比均顯著減小;而實(shí)驗(yàn)組清除率CL與對(duì)照組相比都有增加，且高劑量組差異顯著(563.45±29.76 mL/h/kg，P＜0.05);經(jīng)槲皮素誘導(dǎo)后其表

8、現(xiàn)分布容積與對(duì)照組相比也有增加的趨勢(shì)。
　　本論文最后通過建立在體單向灌流模型來探討經(jīng)槲皮素處理后肉雞腸道P-gp對(duì)羅丹明123(Rho23)外排的影響。實(shí)驗(yàn)分別以15 mg/kg和60 mg/kg槲皮素經(jīng)雞胃連續(xù)誘導(dǎo)3天，以Rho123為探針底物，選取空腸段進(jìn)行在體灌流實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，槲皮素以不同濃度(15 mg/kg、60 mg/kg)連續(xù)誘導(dǎo)肉雞3天后，灌流液中Rho123的濃度有明顯升高趨勢(shì)，藥物吸收速率常數(shù)(Ka)減