SU2237透顱給藥研究.pdf

1、目的：
　　探討新的給藥途徑，用專利活性分子SU2237進(jìn)行大鼠在體透顱吸收的研究；根據(jù)中醫(yī)藥理論，探討SU2237大鼠頭部穴位給藥；改良人工模擬滲透裝置，模擬SU2237體外透顱吸收的研究，預(yù)測藥物透顱的滲透率，并進(jìn)行促進(jìn)劑的篩選，改善腦部疾病患者的依從性，提高藥品對腦部疾病患者的治療效果。
　　方法：
　　SU2237大鼠在體透顱吸收實驗，首先進(jìn)行高效液相色譜法測定的方法學(xué)考察，SU2237進(jìn)入柱子后，分解為阿魏酸

2、（FA）和四甲基吡嗪（TMP），需同時考察阿魏酸（FA）和四甲基吡嗪（TMP）的方法測定學(xué)。特異性考察顯示空白腦組織在SU2237最大吸收波長（287nm）處無吸收。
　　阿魏酸（FA）的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=61315x+19133，R2=0.999；回收率考察結(jié)果低（0.08μg/ml）、中（12.0μg/ml）、高（28.0μg/ml）三個濃度的相對回收率分別為98.3％，108.4%，105.5%，均符合方法學(xué)要求；低(0

3、.08μg/ml)、中(12.0μg/ml)、高(28.0μg/ml)三個濃度分別進(jìn)行日內(nèi)精密度和日間精密度考察，結(jié)果日內(nèi)精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為9.78%，1.14%，2.94%，日間精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為8.85%，1.65%，2.91%，均符合方法學(xué)要求；常溫下10小時的穩(wěn)定性RSD為0.62%，符合方法學(xué)要求。
　　四甲基吡嗪（TMP）的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=60854x-2155.9，R2=0.9992?；厥章?/p>

4、考察結(jié)果低（0.2μg/ml）、中（1.0μg/ml）、高（2.0μg/ml）三個濃度的相對回收率分別為104.1%，109.3%，103.3%，均符合方法學(xué)要求；對低（0.1μg/ml）、中（1.0μg/ml）、高（2.0μg/ml）三個濃度分別進(jìn)行日內(nèi)精密度和日間精密度考察，結(jié)果日內(nèi)精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為3.24%，1.90%，3.81%，日間精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為5.14%，7.30%，0.65%，均符合方法學(xué)要求；常

5、溫下10小時的穩(wěn)定性RSD為0.38%，符合方法學(xué)要求。
　　本專題對SU2237進(jìn)行藥動學(xué)研究，選用大鼠于頭顱涂藥后，分別在第60、90、105、120、180、240、300 min取腦組織，HPLC法測定腦組織中SU2237濃度，3p97程序計算藥動學(xué)參數(shù)。
　　本專題對SU2237進(jìn)行透顱穴位給藥研究，選用大鼠，用毛細(xì)血管于空白處、百會穴和天門穴給藥，在90min處取腦組織，HPLC法測定腦組織中SU2237濃度。<

6、br>　　SU2237大鼠體外模擬透顱吸收并進(jìn)行促進(jìn)劑的篩選，首先進(jìn)行紫外分光光度計測定的方法學(xué)考察，方法的特異性考察顯示人工腦脊液（aCSF）在SU2237最大吸收波長（287nm）處無吸收；SU2237的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=0.072x+0.0024，R2=0.9998；SU2237在氮酮（azone）中的回收率考察結(jié)果低（1.0μg/ml）、中（4.0μg/ml）、高（8.0μg/ml）三個濃度的相對回收率分別為100.7%，9

7、8.1%，97.8%，均符合方法學(xué)要求；SU2237在氮酮（azone）和丙二醇（PG）中的回收率考察結(jié)果低（1.0μg/ml）、中（4.0μg/ml）、高（8.0μg/ml）三個濃度的相對回收率分別為105.4%，97.9%，97.9%，均符合方法學(xué)要求；對低（1.0μg/ml）、中（4.0μg/ml）、高（8.0μg/ml）三個濃度分別進(jìn)行日內(nèi)精密度和日間精密度考察，結(jié)果日內(nèi)精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為2.60%，0.54%，0.8

8、5%，日間精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為6.29%，0.69%，0.94%，均符合方法學(xué)要求；低常溫下12小時的穩(wěn)定性RSD為0.31%，符合方法學(xué)要求。
　　本專題研究藥物SU2237的體外滲透，了解實驗體內(nèi)外相關(guān)性情況。采用Franz試驗擴(kuò)散裝置，將大鼠腦殼固定于擴(kuò)散池的給藥室與接受室之間，加入磁力攪拌子并注入接受液人工腦脊液（aCSF），使腦殼底部與接受液完全接觸，排盡氣泡。取樣品溶液各2.25 ml涂于大鼠腦殼上，將擴(kuò)散池放

9、入集熱式恒溫加熱磁力攪拌器內(nèi)，調(diào)節(jié)1000 r·min-1，水浴溫度37.0±1℃，并開始計時。分別于0、0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10 h時從接受室取出100μl，置于10 ml容量瓶中并用aCSF定容，然后立即向接受室中補(bǔ)充等體積的aCSF。紫外測定SU2237的濃度。
　　結(jié)果：
　　本專題對SU2237進(jìn)行藥動學(xué)研究，選用大鼠于頭顱涂藥后，HPLC法測定腦組織中SU2237濃度，用3P97軟件進(jìn)行數(shù)

10、據(jù)擬合，根據(jù)AIC最小原則計算SU2237的藥動學(xué)參數(shù)。
　　FA在大腦中符合二室吸收動力學(xué)模型。FA的Ka為2.30 h-1, T1/2α為0.37 h，T1/2β為21.60 h，Tmax為0.49 h，Cmax為1.18μg/mL，AUC為2.45μg*h*mL-1，V/F為41.91 L/kg。
　　TMP在大腦中符合一室吸收動力學(xué)模型，TMP的Ka為1.35 h-1，T1/2Ka為0.51 h，T1/2Ke為0.8

11、6 h，Tmax為0.94 h，Cmax為0.23μg/mL，AUC為0.60μg*h*mL-1，V/F為247.44 L/kg。
　　為了探討頭部穴位給藥情況，選用大鼠于頭顱百會穴和天門穴給藥后，HPLC法測定腦組織中SU2237濃度，可以觀察到SU2237透顱吸收滲透，F(xiàn)A在百會穴為0.302715μg/mL，天門穴為0.290752μg/mL，空白處為0.236519μg/mL；TMP在百會穴為0.200133μg/mL，天

12、門穴為0.183201μg/mL，空白處為0.154152μg/mL。
　　數(shù)據(jù)說明體內(nèi)外實驗具有相關(guān)性，可用體外數(shù)據(jù)模擬體內(nèi)實驗。為了模擬體外透顱吸收實驗，采用改良的Franz實驗擴(kuò)散裝置，其中膜改成大鼠腦殼，對滲透促進(jìn)劑進(jìn)行篩選。
　　根據(jù)直線方程計算不同促透劑的透皮速率常數(shù)J，增透倍數(shù) Er和滲透系數(shù)Kr可知，與空白比較，單獨(dú)使用1%azone、4%azone、2%azone+10%PG和2%azone可使SU2237

13、的透皮吸收速率依次增加，對藥物的透皮吸收促進(jìn)作用依次增大，其中2%azone效果最優(yōu)，為1.71倍。
　　結(jié)論：
　　從參數(shù)中觀察到，SU2237的達(dá)峰時間約為0.49小時，表明SU2237可滲透進(jìn)入大腦。SU2237在大腦中的AUC值，表明藥品有相當(dāng)數(shù)量存在于大腦，可以幫助中風(fēng)和大腦相關(guān)疾病的治療。
　　對比透顱吸收和口服吸收參數(shù)表明，SU2237透顱吸收達(dá)峰時間為0.49小時，口服吸收達(dá)峰時間為0.5小時，即說明兩

14、種給藥路徑滲透速度相當(dāng)。SU2237透顱吸收后大腦中的AUC值為2.45μg*h*mL-1，口服吸收后大腦中的AUC值為1.27μg*h*mL-1，顯示透顱給藥更多藥量存在于大腦中，說明透顱吸收較口服吸收更有效。SU2237透顱吸收后大腦中的Cmax為1.18μg*mL-1，口服吸收后大腦中的Cmax為0.62μg*mL-1，說明透顱吸收達(dá)到更大濃度，透顱吸收更有利于用于中風(fēng)和大腦相關(guān)疾病的治療。
　　對百會穴與空白處數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著