“突尼斯軟籽”石榴再生體系和GFP報(bào)告基因的瞬時(shí)表達(dá)研究初報(bào).pdf

1、以“突尼斯軟籽”石榴葉片和莖段為外植體,探討了“突尼斯軟籽”石榴葉片和莖段的再生體系、不同濃度抗生素對外植體的影響以及GFP報(bào)告基因的瞬時(shí)表達(dá)體系。研究結(jié)果如下:
　　 1.建立了“突尼斯軟籽”石榴葉片再生體系。研究結(jié)果表明:從人工氣候室采摘的離體葉片用0.1％HgCl2滅菌4min效果最好；葉片分化愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L；誘導(dǎo)不定芽的最佳的培養(yǎng)基為MS+NAA0.3mg/L+TDZ

2、1.5mg/L+KT1.0mg/L；不定芽抽生成莖段,效果最好的培養(yǎng)基為MS+NAA1.0mg/L+BA0.2mg/L+KT1.0mg/L；生根培養(yǎng)基為MS+1/2NAA0.5mg/L,其根系較粗壯,生根移栽后的成活率可達(dá)85％。
　　 2.建立了“突尼斯軟籽”石榴莖段再生體系。研究結(jié)果表明:從人工氣候室采摘的離體莖段用0.1％HgCl2滅菌3min效果最好；莖段分化愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.1mg/L+TDZ1.0

3、mg/L；愈傷組織分化不定芽的最佳培養(yǎng)基為MS+NAA0.2mg/L+TDZ1.0mg/L+KT1.0mg/L；不定芽抽生莖段,效果最優(yōu)的培養(yǎng)基為MS+NAA0.2mg/L+KT1.0mg/L；之后將這些莖段放入生根培養(yǎng)基MS+1/2NAA0.5mg/L后,產(chǎn)生比較粗壯的根系,生根之后移栽即可成活,成活率可達(dá)85％以上。
　　 3.比較了兩種“突尼斯軟籽”石榴再生體系的優(yōu)越性。研究結(jié)果表明:綜合各種因素,葉片再生效果比莖段效果更

4、佳。
　　 4.篩選了“突尼斯軟籽”石榴外植體對聚乙烯吡咯烷酮的濃度。研究結(jié)果表明:聚乙烯吡咯烷酮(PVP)濃度為1.0g/L時(shí)效果最佳。
　　 5.篩選了“突尼斯軟籽”石榴抗生素的濃度。研究結(jié)果表明:卡那霉素(Kan)的濃度為50mg/L時(shí),愈傷組織受到明顯抑制,可以用來篩選轉(zhuǎn)基因材料；頭孢霉素(Cef)的濃度為500mg/L時(shí),可以有效抑制菌株的生長。
　　 6.初步研究了GFP報(bào)告基因的瞬時(shí)表達(dá)情況。但結(jié)果