PEDV S和豬IL-18聯(lián)合DNA疫苗免疫效果研究.pdf

1、豬流行性腹瀉(PED)是由豬流行性腹瀉病毒(PEDV)引起的以嚴(yán)重的嘔吐、脫水和腹瀉為主要特征的豬的一種急性高度接觸性腸道傳染病。該病的流行給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的損失。目前,雖然商品化PEDV疫苗已廣泛使用,但該病在我國仍有流行。因此,研制安全有效的PEDV疫苗仍然是防治該病的重要研究方向。
　　 S蛋白是PEDV的重要結(jié)構(gòu)蛋白,能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體,是研究PEDV基因工程苗的主要候選基因。本實(shí)驗(yàn)分別將PEDVS、PEDVS1與

2、豬IL-18基因亞克隆到pVAX1真核表達(dá)載體中,構(gòu)建了3種重組真核表達(dá)質(zhì)粒pVAX1-PEDVS、pVAX1-PEDVS1和pVAX1-pIL-18。通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將3個(gè)重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入BHK-21細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá),試驗(yàn)結(jié)果表明,這3個(gè)基因都可以在體外進(jìn)行表達(dá),且表達(dá)的蛋白可以被PEDV和pIL-18多克隆抗體所檢測(cè)。
　　 本試驗(yàn)利用小鼠為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?共分成7個(gè)組,分別為pVAX1-PEDVS組、pVAX1-PEDVS1組、pVA

3、X1-pIL-18組、pVAX1-PEDVS1和pVAX1-pIL-18聯(lián)合免疫組、PED疫苗組、PBS組以及pVAX1組。利用淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等方法對(duì)不同處理組小鼠的各項(xiàng)免疫指標(biāo)進(jìn)行了檢測(cè)。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明,PEDVS組和聯(lián)合免疫組多數(shù)免疫指標(biāo)都高于PEDVS1組,其中以聯(lián)合免疫組免疫效果尤為突出。具體表現(xiàn)為:T淋巴細(xì)胞增殖功能,外周血中抗PEDV特異性抗體水平以及IFN-γ、IL-4的表達(dá)量,脾臟及外周