hAMSCs培養(yǎng)上清液對痤瘡炎癥大鼠模型的組織病理研究.pdf

1、目的：明確人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞（hAMSCs）培養(yǎng)上清液中是否存在抗炎因子IL-10、IL-1受體拮抗劑（IL-1ra）；并從大體和組織病理觀察hAMSCs培養(yǎng)上清液對痤瘡炎癥大鼠模型的影響，探討hAMSCs培養(yǎng)上清液是否具有抗炎作用，以期望為臨床上治療痤瘡提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)及新的治療途徑。
　　方法：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法對hAMSCs培養(yǎng)上清液其中的抗炎因子IL-1ra、IL-10進(jìn)行濃度測定。選取SD大鼠40只，體重25

2、0g±20g，隨機(jī)分為4組：空白對照組、生理鹽水注射組、痤瘡炎癥模型組、hAMSCs培養(yǎng)上清液局部注射治療組?？瞻捉M：不予任何處理；生理鹽水注射組：予以生理鹽水50μL于大鼠左側(cè)耳廓中央皮膚進(jìn)行皮下注射；痤瘡炎癥模型組：予以痤瘡丙酸桿菌菌液50μL于大鼠左側(cè)耳廓中央皮膚進(jìn)行皮下注射；hAMSCs培養(yǎng)上清液局部注射治療組：于痤瘡炎癥模型建模2天后予以hAMSCs培養(yǎng)上清液25μL于相同部位局部皮下注射，每2天一次，共三次。觀察注射前后局部

3、皮膚的改變，并于9天后處死，取局部皮損進(jìn)行組織病理學(xué)觀察，并于高倍鏡下計(jì)數(shù)其炎癥細(xì)胞數(shù)。
　　結(jié)果：1.hAMSCs培養(yǎng)上清液中IL-1ra的濃度為33.33±13.73pg/ml，IL-10的濃度為5.57±4.10pg/ml。2.大體上觀察大鼠耳廓局部皮膚變化：空白組無變化；生理鹽水注射組于注射當(dāng)時(shí)形成腫脹，24小時(shí)后腫脹消退；痤瘡炎癥模型組于注射后持續(xù)紅腫，24小時(shí)后仍未緩解，并于局部逐漸形成小丘疹，局部色紅、質(zhì)硬；hAMS

4、Cs培養(yǎng)上清液局部注射治療組在注射hAMSCs培養(yǎng)上清液2天后耳廓腫脹逐漸消退，但有輕度增厚。3.光學(xué)顯微鏡下觀察：空白組大鼠可見表皮、真皮及皮下組織，結(jié)構(gòu)清楚，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤；生理鹽水注射組見皮膚各層結(jié)構(gòu)清楚，未見明顯炎癥細(xì)胞浸潤；痤瘡炎癥模型組見皮下組織結(jié)構(gòu)消失，炎癥細(xì)胞彌漫性浸潤，部分形成膿腫，部分毛囊面積擴(kuò)大，毛囊口擴(kuò)張，皮脂腺消失；hAMSCs培養(yǎng)上清液局部注射治療組見毛囊皮脂腺縮小，少量炎性細(xì)胞浸潤。4.炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)

5、果：生理鹽水組炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)與空白組炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；hAMSCs培養(yǎng)上清液注射治療組炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于痤瘡炎癥模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；生理鹽水組炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)與hAMSCs培養(yǎng)上清液注射治療組炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論：hAMSCs培養(yǎng)上清液中存在抗炎因子IL-1ra、IL-10。經(jīng)hAMSCs培養(yǎng)上清液局部注射于大鼠痤瘡炎癥模型后，炎癥反應(yīng)明顯減輕，且炎