人參屬植物不同部位中T19的HPLC-ELSD含量測定及制備方法的研究.pdf

1、人參屬植物屬于五加科植物（Panax ginseng C.A.Mey）的一屬，其產(chǎn)地始于地史第三紀古熱帶地區(qū)的山區(qū)的“東亞-北美”、中國的西南部地區(qū)、亞洲東部地區(qū)和北美洲。其中，人參的道地產(chǎn)地主要分布在中國的東北三省、朝鮮的北部地區(qū)等以及被第四紀冰川所覆蓋的屬于北美洲的部分地區(qū)，導(dǎo)致現(xiàn)在只有西洋參和三葉參。而植物三七的分布范圍相對于人參和西洋參來說極其狹小，主要分布于中國的云南省、廣西省、四川省等地域。
　　人參在人參屬中是非常重

2、要的植物之一，同時也是是滋補佳品，它的成分含量非常復(fù)雜，富含人參皂苷、人參多糖、人參蛋白質(zhì)、氨基酸、黃酮類等物質(zhì)[1]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，人參皂苷(Ginsenoside，GS)被證明是人參眾多成分中的最重要的的有效成分，目前已經(jīng)得到研究人員準確證實的人參皂苷單體已有40多種，其具有多種現(xiàn)代藥理活性[2]。目前在世界范圍內(nèi)引起了廣泛的使用，主要用于制藥、食品保健和美容護膚等方面。由于人參廣泛藥理作用，本課題組在1990年發(fā)現(xiàn)人參皂苷T

3、19后，多年來對其進行了一系列更加深入的研究。通過研究發(fā)現(xiàn)其具有非常好的降血糖活性，因此，想對其進行水解工藝研究提高其在原植物中的含量，從而進行大量制備，得到的T19對人參屬植物進行新的藥用資源的利用及開發(fā)都具有非常重要的社會和經(jīng)濟意義。
　　本實驗是在前期多年對人參屬的植物中化學(xué)成分以及藥理活性研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，首次建立了達瑪烷型原人參三醇皂苷成分的含量測定。HPLC-ELSD分析實驗中所使用的色譜柱型號為Agilent C18

4、(250 mm×4.6 mm，5μm)，流動相使用的是甲醇-水系統(tǒng)，體積比為70∶30進行洗脫，流動相流速是1.0 mL/min;蒸發(fā)光檢測器的氣化室溫度為87.0℃，載氣流速根據(jù)蒸發(fā)光檢測器的要求設(shè)定為2.20 L/min;每次進樣體積為10.0μL進行檢測。實驗結(jié)果表明，本實驗所建立的實驗方法中原人參三醇皂苷成分線性關(guān)系良好，專屬性強、精密度高、重復(fù)性好、穩(wěn)定性佳、加樣回收率均符合要求，可用于人參屬植物中上述達瑪烷型原人參三醇皂苷成

5、分的含量測定。
　　本實驗同時通過水解人參莖葉總皂苷，優(yōu)選酸水解工藝，提高原植物中的人參皂苷原三醇組皂苷T19的含量。運用單因素實驗和正交實驗，篩選出酸水解制備20(R)-T19的最佳實驗方案。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，影響人參莖葉酸水解的的主次因素依次是反應(yīng)溫度＞反應(yīng)時間＞鹽酸量＞甲醇量＞鹽酸濃度，優(yōu)選得到的最佳酸水解工藝是甲醇加入量為3.0 ml，鹽酸加入量為15.0 ml，鹽酸濃度為60.0％，反應(yīng)溫度為35.0℃，反應(yīng)時間為2.0 h