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1、本文對(duì)反復(fù)發(fā)作性眩暈動(dòng)物模型的建立及其前庭內(nèi)側(cè)核毒蕈堿受體M2、M3亞型的表達(dá)變化進(jìn)行了研究。本研究分為兩個(gè)部分:
第一部分:
目的:建立豚鼠迷路瘺管導(dǎo)致的反復(fù)發(fā)作的眩暈?zāi)P停糜诤罄m(xù)探討反復(fù)發(fā)作性眩暈的前庭代償機(jī)制
方法:選取成年實(shí)驗(yàn)用豚鼠30只,隨機(jī)分為A、B、C三組。A組為單側(cè)迷路破壞組,B組為迷路瘺管+術(shù)耳鼓氣耳鏡鼓氣組,C組為單純迷路瘺管組。三組分別進(jìn)行手術(shù),動(dòng)物蘇醒出現(xiàn)單側(cè)前庭功能紊亂癥狀后(以
2、此記為為術(shù)后零時(shí)),A、C組作為對(duì)照組不做處理,B組用鼓氣耳鏡適當(dāng)?shù)脑黾踊级舛纼?nèi)的壓力,每天1次。分別于術(shù)后0h、24h、48h、1w、2w、3w等不同時(shí)間段記錄三組動(dòng)物的失衡癥狀即自發(fā)性眼震頻率、頭偏斜及失衡行為評(píng)分。
結(jié)果:借助對(duì)豚鼠自發(fā)性眼震、頭偏斜及失衡行為評(píng)分的實(shí)時(shí)觀察,可知同一時(shí)間段(除0h外)各失衡癥狀B組與其他兩組有顯著性差異。同組內(nèi)自發(fā)性眼震、頭偏斜和失衡行為評(píng)分在各個(gè)時(shí)間段之間均有差異,各時(shí)間段失衡癥狀
3、隨著時(shí)間推移逐漸減輕直至消失,B組減輕程度不及其他兩組。至術(shù)后48h,三組均已無自發(fā)性眼震,B組用鼓氣耳鏡給術(shù)耳外耳道適當(dāng)鼓氣仍可出現(xiàn)(5~6次/15秒)的眼震,其他兩組無。至術(shù)后2w,A、C兩組各失衡癥狀均已不存在,B組仍存在頭偏斜等失衡癥狀,用鼓氣耳鏡給術(shù)耳外耳道適當(dāng)鼓氣仍可出現(xiàn)(5~6次/15秒)的眼震。這種現(xiàn)象直到術(shù)后3w還存在。
結(jié)論:⑴制造迷路瘺管并且用鼓氣耳鏡適當(dāng)增加術(shù)耳外耳道壓力方法可建立的眩暈動(dòng)物模型;⑵本實(shí)
4、驗(yàn)建立的眩暈動(dòng)物模型通過誘發(fā)眩暈可反復(fù)發(fā)作。
第二部分:
目的:制造豚鼠迷路瘺管導(dǎo)致的反復(fù)發(fā)作的眩暈?zāi)P?,觀察不同時(shí)程豚鼠前庭內(nèi)側(cè)核(MVN)毒蕈堿受體M2、M3亞型的表達(dá)變化。
方法:選擇成年實(shí)驗(yàn)用豚鼠88只,并隨機(jī)分配為A組(假手術(shù)組,8只)、B組(單側(cè)迷路損毀組,40只)、C組(迷路瘺管+耳鏡鼓氣組,40只)。A組作為對(duì)照組,B、C組手術(shù)后,依據(jù)豚鼠不同存活時(shí)間(術(shù)后1天、3天、1周、2周、3周)隨機(jī)
5、選取8只。所有豚鼠灌流后取腦干,用免疫組織化學(xué)染色,觀察前庭內(nèi)側(cè)核毒蕈堿受體M2、M3亞型的表達(dá)變化,并與假手術(shù)組比較。
結(jié)果:B、C組術(shù)后均可導(dǎo)致雙側(cè)MVN區(qū)毒蕈堿受體M2、M3亞型表達(dá)減少,術(shù)后1天表達(dá)最少,術(shù)后3天至術(shù)后7天表達(dá)處于上升趨勢(shì),術(shù)后7天時(shí)B組和假手術(shù)組比較表達(dá)無差異,而C組和假手術(shù)組比較表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05)。直到術(shù)后2周,C組和假手術(shù)組比較表達(dá)無差異。B、C組術(shù)后各時(shí)期(術(shù)后2周前)相比,
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