基于BDNF-TrkB信號通路研究痛瀉要方中白芍防風緩解IBS-D內臟高敏的作用機制.pdf

1、目的：
　　選用SD大鼠乳鼠為實驗研究對象，復制IBS-D動物模型，以與腸易激綜合征（IBS）內臟高敏密切相關的BDNF-TrKB信號通路作為切入點，研究痛瀉要方及其拆方緩解IBS內臟高敏與BDNF-TrKB信號通路之間的關系，深入探討痛瀉要方及拆方緩解腸易激綜合征（IBS）內臟高敏的作用原理。
　　方法：
　　模型組SD大鼠出生后8-21天接受PTCA球囊進行結直腸擴張（壓力60mmHg），給予充足的水及食物。在隨機

2、抽取20只大鼠作為正常組大鼠（雌雄各半），其余大鼠均為模型大鼠。
　　飼養(yǎng)至第8周，通過結直腸擴張檢測觀察大鼠腹部回縮反應（abdominal wi thdrawal reflex，AWR）。將除正常組大鼠外的所有大鼠隨機分為4組：模型組、全方組、白芍防風組、陳皮白術組，次日予以藥物灌喂治療。
　　在實驗過程中觀察每組大鼠一般情況及大便情況。于造模前后、治療前后稱重每只大鼠體重。于造模后和治療結束后檢測每組大鼠大便含水量和記

3、錄Bristo l大便分類評分。于治療前后檢測每只大鼠腹部回縮反應（AWR）。于結束治療后次日采血，摘取距肛門5-8cm結腸組織及海馬組織。
　　每組分別采用10只大鼠海馬組織和結腸組織進行基因芯片實驗；從芯片原始數據中提取BDNF信號系統(tǒng)包含的所有基因（BDNF、TrkB等）的表達值。
　　結果：
　?、俅笫笠话闱闆r觀察：正常組大鼠：一般情況佳。模型組大鼠：大鼠造模3天后逐漸出現一般情況減退，大便顆粒數增多，可見稀便

4、及肛周毛發(fā)被稀便污染。全方組和白芍防風組大鼠：大鼠自藥物灌胃3-5天起逐漸一般情況好轉，灌胃10-14天后大便腹瀉情況基本緩解，體重增長速度逐漸回升。陳皮白術組大鼠：大鼠自藥物灌胃10天后逐漸出現一般情況緩解，但至實驗結束時，少部分大鼠仍有大便偏稀的情況。
　?、诖笫篌w重增長量：與正常組相比，模型組大鼠體重增長量明顯較正常組少（P＜0.05）。治療結束后，全方組與白芍防風組大鼠體重增長量較模型組增高，（P＜0.05）；陳皮白術組大

5、鼠體重增長量較模型組不明顯（P＞0.05）。
　?、鄞笫蟠蟊闱闆r：造模后，模型組大鼠大便含水量及大便Bristol分級評分較正常組明顯升高（P＜0.05）；治療后，全方組大鼠和白芍防風組大鼠與同期模型組大鼠比較，大便含水量及大便Bristol分級評分明顯降低，差異存在統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；全方組大鼠和白芍防風組大鼠治療前后自身對照大便含水量及大便Bristol分級降低（P＜0.05）；而模型組大鼠和陳皮白術組大鼠同期比較和自

6、身組內前后對照比較大便含水量及大便Bristol分級評分情況改變不明顯（P＞0.05）。
　?、艽笫髢扰K疼痛閾值：與正常組比較，模型組大鼠內臟疼痛閾值降低（P＜0.05）；同期大鼠雌雄內臟疼痛閾值比較，雌性大鼠內臟疼痛閾值明顯低于雄性大鼠內臟疼痛閾值（P＜0.05）；治療結束后，全方組和白芍防風組大鼠內臟疼痛閾值較治療前升高（P＜0.05）；模型組和陳皮白術組治療前后內臟疼痛閾值改變不明顯（P＞0.05）。
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7、理學檢測：各組大鼠結腸上皮組織和海馬組織均無明顯炎性細胞浸潤和間質水腫，符合IBS病理學改變。
　?、薮笫驜DNF-TrkB基因表達：在結腸組織中，模型組大鼠BDNFmRNA和TrkBmRNA表達值明顯高于正常組（P＜0.05）；與模型組比較，全方組和白芍防風組大鼠結腸組織中BDNFmRNA和TrkBmRNA表達值較模型組大鼠的表達值降低（P＜0.05）；在海馬組織中，模型組大鼠海馬組織中BDNFmRNA表達值較正常組大鼠表達量降

8、低（P＜0.05），而模型組海馬組織中TrkBmRNA表達值較正常組升高（P＜0.05）；全方組、白芍防風組、陳皮白術組大鼠海馬組織中TrkBmRNA表達值同模型組相比差異不明顯，但存在明顯下降趨勢。
　　結論：
　?、偻礊a要方可改善模型組大鼠IBS-D的病理狀態(tài)。
　?、谕礊a要方中“抑木”組分-白芍防風是治療IBS-D的有效組分。
　　③BDNF-TrkB信號通路可能是腸易激綜合征內臟高敏形成的機制之一。