超聲介導(dǎo)載紫杉醇及miR-34a微泡對宮頸癌協(xié)同抑制作用的體內(nèi)外實驗研究.pdf

1、目的：
　　通過自制超聲微泡同時包載紫杉醇和miR-34a，并檢測微泡的一般性質(zhì)，通過體內(nèi)外實驗，評價超聲介導(dǎo)載紫杉醇及miR-34a微泡作用于宮頸癌的協(xié)同抑制效果。
　　方法：
　?。?）采用改良雙乳劑揮發(fā)法和低溫真空干燥技術(shù)，自制載紫杉醇及miR-34a微泡，通過掃描電鏡觀察微泡形態(tài)，粒徑分布儀檢測微泡粒徑大小和分布，紫外分光光度計分析藥物濃度計算載藥量和包封率。
　?。?）超聲介導(dǎo)載紫杉醇及miR-34a微

2、泡作用于U14宮頸癌細(xì)胞，Western Blotting檢測U14細(xì)胞中Bcl-2和CDK6蛋白的表達(dá)情況。
　?。?）建立U14宮頸癌皮下移植瘤模型，并進(jìn)行隨機(jī)分組，分為：空白對照組、空微泡+超聲組、miR-34a微泡+超聲組、紫杉醇微泡+超聲組、紫杉醇聯(lián)合miR-34a微泡+超聲組。每三天進(jìn)行一次相應(yīng)的處理，根據(jù)腫瘤體積繪制腫瘤生長曲線，在實驗結(jié)束時處死小鼠，計算各組體積和質(zhì)量抑瘤率，腫瘤組織行病理組織學(xué)檢查，免疫組織化學(xué)法

3、檢測各組腫瘤組織微血管密度（MVD）的表達(dá)情況，Western blotting檢測各組腫瘤組織Bax、Bcl-2和CDK6蛋白的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　?。?）載紫杉醇及miR-34a微泡電鏡下呈圓形，表面光滑，粒徑分布儀檢測平均粒徑為1.76μm，紫外分光光度計分析藥物濃度，紫杉醇的載藥量為11.86％，包封率為89.68%，miR-34a的包封率為33.11%。
　?。?）超聲介導(dǎo)載紫杉醇及miR-34a微泡作

4、用于U14宮頸癌細(xì)胞，與對照組相比，U14細(xì)胞中Bcl-2和CDK6蛋白表達(dá)均下調(diào)。
　?。?）超聲介導(dǎo)載紫杉醇及miR-34a微泡作用于U14宮頸癌皮下移植瘤，與對照組相比，紫杉醇聯(lián)合miR-34a微泡組生存狀態(tài)最好，腫瘤生長明顯減慢，腫瘤體積和質(zhì)量明顯下降（P<0.01），其體積和質(zhì)量抑瘤率分別為78.57%、87.97%，明顯高于其它各組（P<0.01）；HE染色觀察，用藥的四組腫瘤組織呈現(xiàn)不同程度變性壞死，紫杉醇聯(lián)合miR

5、-34a微泡組表現(xiàn)最為明顯，癌細(xì)胞數(shù)目減少，并可見大量核固縮和核碎屑以及大片無組織紅染區(qū)；免疫組織化學(xué)法顯示用藥的四組腫瘤組織MVD表達(dá)不同程度減少，以紫杉醇聯(lián)合miR-34a微泡組減少最為明顯（P<0.01）；Western blotting結(jié)果顯示，與對照組相比，用藥的四組腫瘤組織Bax的表達(dá)上調(diào)，Bcl-2和CDK6的表達(dá)下調(diào)，以紫杉醇聯(lián)合miR-34a微泡組表現(xiàn)最為明顯（P<0.01）。
　　結(jié)論：
　　超聲介導(dǎo)載紫