心肺復(fù)蘇后大鼠腦組織SSAT2與HIF-lalpha表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律.pdf

1、第一部分:大鼠心肺復(fù)蘇模型的建立
　　 目的:建立一種穩(wěn)定的大鼠心肺復(fù)蘇模型。
　　 方法:成年SD大鼠66只,隨機(jī)數(shù)字法分為正常對照組8只,假手術(shù)組8只,復(fù)蘇組50只。復(fù)蘇組從頸外靜脈彈丸式注射氯化鉀致大鼠心搏驟停,持續(xù)5min后進(jìn)行胸外按壓和機(jī)械通氣。假手術(shù)組只進(jìn)行經(jīng)口氣管插管和血管內(nèi)置管。監(jiān)測基本生命體征,記錄自主循環(huán)恢復(fù)時(shí)間,對復(fù)蘇后24h、72h的進(jìn)行神經(jīng)功能評分,觀察正常對照組、假手術(shù)組和復(fù)蘇后1h、12h、

2、72h各時(shí)間點(diǎn)的腦組織病理形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果:大鼠注入氯化鉀后立即出現(xiàn)循環(huán)停止,自主循環(huán)恢復(fù)時(shí)間為(343.6±120.2)s,自主循環(huán)恢復(fù)率為80％(40/50),24h存活率為76%,72h存活率為74%。復(fù)蘇后24h神經(jīng)功能評分為(64.73±1.66)分,72h為(73.19±1.33)分。復(fù)蘇后1h腦組織缺血缺氧性損傷最重,24h次之,72h逐漸好轉(zhuǎn)。
　　 結(jié)論:本模型穩(wěn)定可靠,操作簡便且易于復(fù)蘇,最明

3、顯的改進(jìn)之處在于采用經(jīng)口氣管插管法來最大限度地減少組織損傷和對機(jī)體的影響,從而更加適合于心肺復(fù)蘇后期的腦復(fù)蘇研究。
　　 第二部分:精脒/精胺-N1-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2、HIF-1α在心肺復(fù)蘇后大鼠腦組織表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律
　　 目的:研究心肺復(fù)蘇后大鼠腦組織中精脒/精胺-N1-乙?；D(zhuǎn)移酶2(spermidine/spennine-N1-acetyltransferase2,SSAT2)與缺氧誘導(dǎo)因子-1α(bypoxia

4、 inducible factor1 alpha,HIF-1α)表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律,分析二者相關(guān)性。
　　 方法:88只成年SD大鼠隨機(jī)數(shù)字法分為正常對照組、假手術(shù)組和心肺復(fù)蘇組。其中假手術(shù)組和心肺復(fù)蘇組再分為1、8、24、48、72h5個(gè)亞組,每亞組8只。采用RT-PCR、Western blot方法分別檢測腦組織中HIF-1αmRNA和HIF-1α、SSAT2蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:SSAT2的表達(dá)在復(fù)蘇后明顯降低

5、,1h(0.314±0.027,P＜0.01)表達(dá)最低,隨后下降趨勢逐漸減弱(P＜0.01),至72h(0.731±0.024,P＞0.05)時(shí)恢復(fù)到正常對照組水平(0.736±0.020),而假手術(shù)組SSAT2的表達(dá)與正常對照組相比無顯著變化(P＞0.05)。HIF-1αmRNA的表達(dá)在復(fù)蘇后1h(0.245±0.021,P＜0.05)時(shí)降低,但8h(0.430±0.019,P＜0.05)時(shí)明顯增強(qiáng),24h(0.387±0.018,P

6、＜0.05)、48h(0.385±0.019,P＜0.05)輕度增加,至72h時(shí)回落到正常對照組水平(0.343±0.022):但HIF-1α蛋白表達(dá)水平在復(fù)蘇后1h(0.755±0.012,P＜0.01)顯著增高,隨后增高趨勢逐漸減緩(P＜0.01),至72h(0.033±0.002,P＜0.01)時(shí)僅輕度增高,而在正常對照組和假手術(shù)組未能檢測出HIF-1α表達(dá)。SSAT2表達(dá)與HIF-1α表達(dá)在復(fù)蘇后72h內(nèi)呈負(fù)性相關(guān)(r=-0.9

7、45,P＜0.001),SSAT2表達(dá)與HIF-1αmRNA表達(dá)在復(fù)蘇后8～48h呈負(fù)相關(guān)(r=-0.614,P=0.001)。
　　 結(jié)論:在心肺復(fù)蘇后72h內(nèi),大鼠腦組織HIF-1α蛋白表達(dá)升高且升高趨勢逐漸減弱,SSAT2表達(dá)下降且下降趨勢逐漸放緩;復(fù)蘇后8～48h時(shí),HIF-1αmRNA表達(dá)增加且增加趨勢逐漸減緩。SSAT2與HIF-1α、HIF-1αmRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)且變化趨勢相反,提示SSAT2對HIF-1α、HI