Tempol對(duì)大鼠背部超長(zhǎng)任意皮瓣存活影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
　　研究新型小分子氧自由清除劑Tempol對(duì)大鼠背部超長(zhǎng)任意皮瓣存活的影響，并從抗氧化應(yīng)激、促進(jìn)血管生成，減輕炎癥反應(yīng)三個(gè)方面探討其作用機(jī)制，為闡明缺血再灌注損傷造成皮瓣遠(yuǎn)端發(fā)生壞死的發(fā)生機(jī)制提供了理論依據(jù)，為如何減輕缺血再灌注損傷造成皮瓣遠(yuǎn)端出現(xiàn)嚴(yán)重壞死，提高任意皮瓣應(yīng)用效率，覆蓋關(guān)鍵創(chuàng)面提供新思路。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　1.隨機(jī)將84只雄性成年SD大鼠分為生理鹽水對(duì)照組和Tempol組，42只/組，所有

2、皮瓣均參考Mcfarlane皮瓣進(jìn)行切取，于大鼠背部制備面積為9cm*3cm大小的LRPSF。Tempol組術(shù)前15min至術(shù)后第7天，每天按(100mg/Kg)腹腔注射Tempol（1∶10生理鹽水稀釋后），生理鹽水對(duì)照組:按相同的方法注射等量的生理鹽水。皮瓣移植后及時(shí)觀察、記錄每組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物成活及皮瓣存活情況;第7天，測(cè)量各組大鼠皮瓣成活率，（1g/ml）明膠氧化鉛灌注后行MicroCT血管三維成像觀察血管生成情況并利用3D-view

3、er及MAT-LAB軟件計(jì)算血管長(zhǎng)度和血管容積。
　　2.術(shù)后第7天剪取皮瓣中段組織行HE染色觀察皮瓣組織層次結(jié)構(gòu)、血管生成、炎癥反應(yīng)及組織壞死程度，同時(shí)行免疫組織化學(xué)染色觀察VEGF表達(dá)情況。
　　3.術(shù)后即刻及第1，3，7天，將皮瓣中段組織勻漿，采用水溶性四氮唑-1法及可見(jiàn)光法分別測(cè)定抗氧化酶SOD和脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量;利用ELISA相關(guān)試劑盒檢測(cè)皮瓣組織中炎性因子TNF-α和IL-6含量。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果：<

4、br>　　1.所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均成活至實(shí)驗(yàn)完成，各組皮瓣均無(wú)感染、皮瓣下血腫皮及瓣下積液。隨時(shí)間延長(zhǎng)，兩組皮瓣遠(yuǎn)端均發(fā)生不同程度的壞死，但Tempol組皮瓣壞死程度較生理鹽水對(duì)照組輕;且Tempol組血管分布及連續(xù)性均優(yōu)于生理鹽水對(duì)照組。術(shù)后第7天Tempol組皮瓣成活率、血管容積及血管總長(zhǎng)度均顯著高于生理鹽水對(duì)照組(p＜0.05或p＜0.01)。
　　2.術(shù)后第7天組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色觀察示，與生理鹽水對(duì)照組比較，Tempol組

5、皮瓣各層組織結(jié)構(gòu)清楚，微小血管生成明顯增多，組織炎癥反應(yīng)及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)較輕，真皮組織內(nèi)VEGF蛋白染色程度明顯增高。
　　3.測(cè)量?jī)山M皮瓣組織勻漿后發(fā)現(xiàn)，術(shù)后1，3，7天兩組皮瓣組織SOD、MDA、TNF-α、IL-6差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Tempol組MDA、TNF-α、IL-6含量明顯低于生理鹽水對(duì)照組，SOD含量明顯高于生理鹽水對(duì)照組(P＜0.05);而術(shù)后即刻兩組皮瓣組織勻漿各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。