加減三甲散對肝纖維化大鼠模型血流變及iNOS和ET-1的影響.pdf

1、目的：
　　觀察加減三甲散對免疫性肝纖維化大鼠血液流變學以及血管活性物質一氧化碳氧合酶（iNOS）和內皮素-1（ET-1）的影響，探討三甲散抗肝纖維化的效果和作用機理。
　　方法：
　　選用健康清潔級Wistar雄性大鼠24只，隨機分組設正常對照組（簡稱正常組或空白組）6只、模型對照組6只（簡稱模型組）、陽性對照組（簡稱鱉甲片組）6只和加減三甲散組（簡稱三甲散組）6只，適應性飼養(yǎng)一周后，除正常對照組外其余三組均采用豬血

2、清腹腔注射復制免疫損傷性肝纖維化動物模型。造模后，各組給與灌胃給藥，1次/d，正常對照組及病理模型組給予同體積的0.9％生理鹽水灌胃，三甲散組給予加減三甲散方藥物灌胃，鱉甲片組給予復方鱉甲軟肝片灌胃，灌胃治療60天后，麻醉處死各組大鼠，HE和MASSON染色觀察肝臟病理形態(tài)，測定凝血指標PT、APTT、TT、FlB全自動血液流變學檢測儀檢測血液流變學指標，免疫組化檢測肝組織中iNOS和ET-1的含量，RT-PCR技術檢測肝組織中iNOS

3、和ET-1的mRNA表達。
　　結果：
　　1.肝臟病理形態(tài)學觀察：HE和MASSON染色后，光鏡下正常組大鼠肝小葉結構完整，肝細胞未見變性及壞死，無明顯纖維結締組織增生。模型組大鼠肝組織正常結構被破壞，肝索排列紊亂，肝細胞腫脹，部分出現(xiàn)脂肪或氣球樣變，門管區(qū)及肝小葉內可見灶性淋巴細胞浸潤，間質細胞大量彌漫性增生，中央靜脈周邊及匯管區(qū)出現(xiàn)大量纖維組織，形成纖維橋連接。
　　2.凝血功能的觀察：與空白組相比較，模型組PT

4、、APTT、TT水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；三甲散組、鱉甲片組PT、APTT、TT水平較模型組水平低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；兩治療組間PT、APTT、TT水平的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）；各組間FIB下降無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　3.血流變學相關指標檢測：與正常組相比，模型組大鼠全血黏度200/s切變率、5/s切變率、血漿黏度、HCT、紅細胞聚集數(shù)、ESR顯著升高（P<0.05）；與

5、模型組相比，三甲散組、鱉甲片組的全血黏度200/s切變率、5/s切變率、血漿黏度、紅細胞壓積、紅細胞聚集數(shù)、血沉顯著降低（P<0.05），差異具有統(tǒng)計學意義；三甲散組、鱉甲片組200/s切變率、5/s切變率，血漿黏度、紅細胞壓積、紅細胞聚集數(shù)、血沉無明顯差異（P>0.05）。
　　4.與空白組相比較，模型組iNOS、ET-1含量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；三甲散組、鱉甲片組iNOS、ET-1含量比空白組要高，差異

6、具有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而相比較模型組，則明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；三甲散組與鱉甲片組iNOS、ET-1含量無明顯差異（P>0.05）。
　　5.與空白組相比較，模型組iNOSmRNA、ET-1mRNA含量明顯升高，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；三甲散組、鱉甲片組iNOSmRNA、ET-1mRNA含量與空白組無差別（P>0.05），而相比較模型組，則明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；三

7、甲散組與鱉甲片組iNOSmRNA、ET-1mRNA含量無明顯差異（P>0.05）。
　　結論：
　　1.加減三甲散可改善肝纖維化大鼠凝血功能，具有一定的抗肝纖維化效果。
　　2.加減三甲散可改善大鼠不同切變率的全血粘度（200/s、5/s）、血漿粘度、血細胞壓積、紅細胞聚集數(shù)、血沉，此可能為其改善肝竇微循環(huán)障礙，對抗纖維化的機制之一。
　　3.加減三甲散能夠降低血管活性物質iNOS、ET-1含量及其mRNA的表達