加減三甲散對(duì)肝纖維化大鼠模型血流變及iNOS和ET-1的影響.pdf

1、目的：
　　觀察加減三甲散對(duì)免疫性肝纖維化大鼠血液流變學(xué)以及血管活性物質(zhì)一氧化碳氧合酶（iNOS）和內(nèi)皮素-1（ET-1）的影響，探討三甲散抗肝纖維化的效果和作用機(jī)理。
　　方法：
　　選用健康清潔級(jí)Wistar雄性大鼠24只，隨機(jī)分組設(shè)正常對(duì)照組（簡(jiǎn)稱正常組或空白組）6只、模型對(duì)照組6只（簡(jiǎn)稱模型組）、陽(yáng)性對(duì)照組（簡(jiǎn)稱鱉甲片組）6只和加減三甲散組（簡(jiǎn)稱三甲散組）6只，適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后，除正常對(duì)照組外其余三組均采用豬血

2、清腹腔注射復(fù)制免疫損傷性肝纖維化動(dòng)物模型。造模后，各組給與灌胃給藥，1次/d，正常對(duì)照組及病理模型組給予同體積的0.9％生理鹽水灌胃，三甲散組給予加減三甲散方藥物灌胃，鱉甲片組給予復(fù)方鱉甲軟肝片灌胃，灌胃治療60天后，麻醉處死各組大鼠，HE和MASSON染色觀察肝臟病理形態(tài)，測(cè)定凝血指標(biāo)PT、APTT、TT、FlB全自動(dòng)血液流變學(xué)檢測(cè)儀檢測(cè)血液流變學(xué)指標(biāo)，免疫組化檢測(cè)肝組織中iNOS和ET-1的含量，RT-PCR技術(shù)檢測(cè)肝組織中iNOS

3、和ET-1的mRNA表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.肝臟病理形態(tài)學(xué)觀察：HE和MASSON染色后，光鏡下正常組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)完整，肝細(xì)胞未見變性及壞死，無明顯纖維結(jié)締組織增生。模型組大鼠肝組織正常結(jié)構(gòu)被破壞，肝索排列紊亂，肝細(xì)胞腫脹，部分出現(xiàn)脂肪或氣球樣變，門管區(qū)及肝小葉內(nèi)可見灶性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，間質(zhì)細(xì)胞大量彌漫性增生，中央靜脈周邊及匯管區(qū)出現(xiàn)大量纖維組織，形成纖維橋連接。
　　2.凝血功能的觀察：與空白組相比較，模型組PT

4、、APTT、TT水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；三甲散組、鱉甲片組PT、APTT、TT水平較模型組水平低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩治療組間PT、APTT、TT水平的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；各組間FIB下降無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　3.血流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)：與正常組相比，模型組大鼠全血黏度200/s切變率、5/s切變率、血漿黏度、HCT、紅細(xì)胞聚集數(shù)、ESR顯著升高（P<0.05）；與

5、模型組相比，三甲散組、鱉甲片組的全血黏度200/s切變率、5/s切變率、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞聚集數(shù)、血沉顯著降低（P<0.05），差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；三甲散組、鱉甲片組200/s切變率、5/s切變率，血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞聚集數(shù)、血沉無明顯差異（P>0.05）。
　　4.與空白組相比較，模型組iNOS、ET-1含量明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；三甲散組、鱉甲片組iNOS、ET-1含量比空白組要高，差異

6、具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而相比較模型組，則明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；三甲散組與鱉甲片組iNOS、ET-1含量無明顯差異（P>0.05）。
　　5.與空白組相比較，模型組iNOSmRNA、ET-1mRNA含量明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；三甲散組、鱉甲片組iNOSmRNA、ET-1mRNA含量與空白組無差別（P>0.05），而相比較模型組，則明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；三

7、甲散組與鱉甲片組iNOSmRNA、ET-1mRNA含量無明顯差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.加減三甲散可改善肝纖維化大鼠凝血功能，具有一定的抗肝纖維化效果。
　　2.加減三甲散可改善大鼠不同切變率的全血粘度（200/s、5/s）、血漿粘度、血細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞聚集數(shù)、血沉，此可能為其改善肝竇微循環(huán)障礙，對(duì)抗纖維化的機(jī)制之一。
　　3.加減三甲散能夠降低血管活性物質(zhì)iNOS、ET-1含量及其mRNA的表達(dá)