液-固界面的吸附及溶菌酶在液相色譜中復性的應用研究.pdf

1、西北大學博士學位論文液固界面的吸附及溶菌酶在液相色譜中復性的應用研究姓名：王彥申請學位級別：博士專業(yè)：分析化學指導教師：耿信篤20021001SDT—R)這兩個分別表征吸附和保留過程的理論統(tǒng)一了起來，證明在SDTR中的容量因子的對數(shù)logk’與SDT—A中溶質對吸附劑親合勢的參數(shù)p。之間存在線性關系。從理論上推導出口。值與溶劑濃度的對數(shù)作圖收斂點的存在并闡明了收斂點坐標的物理意義，與實驗作圖法得到的數(shù)據(jù)進行了對比，符合情況很好。4從氣一

2、固吸附體系中推導出的Langmuir方程，在氣固吸附中是一個定量的公式，但近一世紀來只能經(jīng)驗性地描述組份在液相中的吸附。本研究以液固界面上的SDT為基礎，考慮到液固吸附體系中各組分之間的相互作用，首次從理論上推導出了在液固體系中描述在不同溶劑濃度條件下，溶質從溶液中吸附的Langmuir公式，并稱其為擴展的Langmuir公式。以不同溶劑濃度條件下所得到的吸附等溫線數(shù)據(jù)對理論推導出的擴展的Langmuir公式進行了驗證，與計量置換平衡中

3、的參數(shù)相關聯(lián)，表明用吸附等溫線法計算的計量置換參數(shù)z與用高效液相色譜法得到的z值符合程度很好同時研究發(fā)現(xiàn)卵清蛋白在疏水整體色譜柱的吸附與流動相中鹽濃度有直接的關系。當?shù)鞍自谏V柱上保留時，在相同的溶質濃度條件下其吸附量的對數(shù)與置換劑水的摩爾濃度對數(shù)之間有非常好的線性關系。5以溶菌酶(Lys)為目標蛋白，用紫外(UV)，熒光(FR)，RPLC，弱陽離子交換色譜(WCX)及SDT中的Z值系統(tǒng)地研究了四種不同變性狀態(tài)(胍變還原與非還原，脲變還

4、原與非還原)的Lys的分子構象變化，并與其天然態(tài)進行了比較發(fā)現(xiàn)這四種不同變性狀態(tài)的Lys與天然態(tài)Lys的uV之間沒有明顯區(qū)別，但與天然態(tài)相比，這四種變性態(tài)的tys的FR卻都有紅移現(xiàn)象然而熒光光譜并不能反映出這四種變性態(tài)以不同的變性方式所引起的分子構象變化Lys在RPLC和WCX的保留行為卻能夠反映出其還原變性態(tài)與非還原變性態(tài)之間的差別，但仍不能顯示出不同變性劑引起的蛋白分子的構象變化只有液固界面上SDT中的參數(shù)Z值才能反映出上述所有的差