TUDCA修復(fù)小鼠脊髓損傷分子機(jī)制的初步研究.pdf

1、脊髓損傷(Spinal cord injury，SCI)通常始于一個(gè)突然的、機(jī)械的打擊或椎骨骨折脫臼引起的脊柱破裂,SCI作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾?。–NS）的一大類，目前尚無(wú)明確有效的治療方法。SCI可以分為原發(fā)性和繼發(fā)性脊髓損傷，繼發(fā)性損傷會(huì)引起細(xì)亡,導(dǎo)致神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的死亡。已有相關(guān)報(bào)道指出，SCI過(guò)程中會(huì)使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)環(huán)境變化失衡，進(jìn)而誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)生一系列應(yīng)激反應(yīng)。?；侨ッ撗跄懰?TUDCA)是一種內(nèi)源性膽汁酸作為公認(rèn)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)抑制劑

2、被發(fā)現(xiàn)可以改善糖尿病的狀態(tài)、帕金森病、急慢性肝臟疾病、阿爾茨海默病等。據(jù)其在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的作用，本文將研究在脊髓損傷后的模型中TUDCA能否有效的減輕脊髓損傷并改善小鼠的運(yùn)動(dòng)功能，為今后的脊髓損傷修復(fù)研究提供理論依據(jù)。
　　本研究將KM小白鼠隨機(jī)的分為三組:對(duì)照組、SCI組和TUDCA治療組，SCI組我們用Nystrom法壓迫脊髓T7-T9制作損傷模型，對(duì)照組只切開(kāi)錐板而不壓迫脊髓，TUDCA組在脊髓損傷后立即注射TUDCA。對(duì)

3、損傷后不同的時(shí)間點(diǎn)(4h,8h,1d,3d和7d)的小鼠通過(guò)斜板實(shí)驗(yàn)進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能評(píng)估，而后將小鼠處死提取脊髓RNA進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)，觀察相關(guān)基因在脊髓中的表達(dá)情況,另取1,3和7天的小鼠脊髓組織制作損傷部位的切片，進(jìn)行HE染色和細(xì)胞凋亡檢測(cè)，觀測(cè)各實(shí)驗(yàn)組各個(gè)時(shí)間段下組織的病理形態(tài)學(xué)改變和細(xì)胞凋亡數(shù)目變化。結(jié)果顯示,對(duì)照組小鼠未見(jiàn)明顯截癱，而SCI組和TUDCA組小鼠均出現(xiàn)不同程度的下肢癱瘓，實(shí)驗(yàn)組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的爬坡結(jié)果都較對(duì)照組

4、有明顯降低，而 TUDCA組1d前各時(shí)間點(diǎn)下肢功能恢復(fù)較SCI組好，而3d和7d中較SCI組降低。在對(duì)照組中并沒(méi)有見(jiàn)到有明顯的凋亡細(xì)胞產(chǎn)生，而SCI和 TUDCA組都會(huì)呈現(xiàn)出不同水平的凋亡?；驒z測(cè)發(fā)現(xiàn)，PUMA和NOXA在TUDCA組顯著低于SCI組在受傷8d和1d時(shí),但在3d和7d更高。Grp78和CHOP基因顯示出相似的趨勢(shì)即在注射TUDCA后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均較SCI組降低。TUDCA組的小鼠運(yùn)動(dòng)功能顯示1天前呈恢復(fù)的趨勢(shì)，3天的運(yùn)動(dòng)