免疫磁性微球技術(shù)在α-2bIFN純化中的研究與應(yīng)用.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究選用基因工程干擾素α-2b(α-2bIFN)為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,利用免疫磁性微球技術(shù)對(duì)其進(jìn)行分離純化研究.該研究首先制備了抗α-2bIFN(Anti-IFN-IgG)和抗聚合α-2bIFN(Anti-PIFN-IgG)血清,經(jīng)分級(jí)鹽析、DEAE-cellulose 52離子交換層析分別精制IgG抗體.以Ante-PIFN-IgG為固相抗體,以生物素標(biāo)記的Anti-IFN-IgG為示蹤抗體,建立了α-2bIFN的夾心式酶聯(lián)免疫測(cè)定法(san

2、dwich ELISA).將Anti-IFN-IgG抗體與CNBr Activated Sepharose-4B偶聯(lián),制備了親和層析柱,并對(duì)α-2bIFN粗提物進(jìn)行親和層析純化.分別采用反相懸浮包埋法和種子聚合法制備了粒徑為50-100μm的瓊脂糖磁性微球和聚苯乙烯磁性微球,以其為載體考察抗體的致敏條件和免疫磁性分離條件.結(jié)果表明瓊脂糖磁性微球經(jīng)環(huán)氧氯丙烷活化后,引入戊二醛側(cè)臂連接Anti-IFN-IgG抗體,抗體偶聯(lián)量達(dá)到8.4mg/

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