微納米技術(shù)在DNA檢測(cè)與抗體純化中的應(yīng)用.pdf

1、目前，微納米技術(shù)在分析檢測(cè)中的應(yīng)用越來(lái)越多。納米材料與DNA結(jié)合在疾病的診斷與治療中發(fā)揮著重要的作用?；诮鸺{米粒子和熒光量子點(diǎn)獨(dú)特的一系列物理、化學(xué)性質(zhì)，特別是其生物相容性，它們?cè)谏锓治鲱I(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction, PCR)是一種體外特定核酸序列擴(kuò)增技術(shù)，是現(xiàn)代分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的工作基礎(chǔ)之一，在生命科學(xué)、遺傳學(xué)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。在本論文中，把金納米粒子和熒光量子點(diǎn)應(yīng)用于

2、PCR過(guò)程中，實(shí)現(xiàn)界面PCR擴(kuò)增，建立了DNA檢測(cè)的新方法。
　　 金納米粒子對(duì)熒光量子點(diǎn)在一定距離內(nèi)有熒光淬滅作用，在本論文研究中選用了不同DNA擴(kuò)增長(zhǎng)度(50～1003bp)的核酸片段，不同擴(kuò)增長(zhǎng)度的上游和下游引物通過(guò)不同的化學(xué)鍵作用被偶聯(lián)到金納米粒子和量子點(diǎn)表面上，在PCR的作用下，量子點(diǎn)和金納米粒子通過(guò)雙鏈DNA連接起來(lái)，在這個(gè)過(guò)程中，金納米粒子對(duì)量子點(diǎn)會(huì)產(chǎn)生熒光淬滅作用，熒光淬滅程度根據(jù)金納米粒子與量子點(diǎn)之間的距離不同

3、而不同，也就是兩個(gè)粒子之間雙鏈DNA長(zhǎng)度的不同。作為新方法、新理論的研究，我們根據(jù)在PCR后金納米粒子對(duì)量子點(diǎn)熒光淬滅程度的不同，從而可以建立熒光強(qiáng)度與DNA長(zhǎng)度之間的線性關(guān)系，結(jié)論是隨著金納米粒子和量子點(diǎn)兩個(gè)粒子之間距離的增大(50～1003bp)，熒光淬滅作用逐漸減弱，建立DNA檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，并應(yīng)用于病原微生物實(shí)際樣品的檢測(cè)。
　　 聚苯乙烯微球是一種優(yōu)良的載體，在聚苯乙烯微球表面引入羧基、氨基、羥基或者其它官能團(tuán)，可用于