Cx43在人卵巢顆粒細胞中的表達及與體外受精——胚胎移植結局關系的研究.pdf

1、背景及目的：
　　 隨著不孕癥發(fā)病率的逐年提高，越來越多的人開始選擇通過人類輔助生殖技術獲取健康的后代。自從體外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET)技術開展以來，各國從事輔助生殖技術的研究工作者和臨床醫(yī)師，通過大量的科學實驗與臨床工作，不斷改進技術，調(diào)整用藥方案，使得體外受精-胚胎移植技術的成功率得以顯著提高。然而，在進行輔助生殖技術助孕過程中，總有部分患者

2、難以獲取滿意的結果，其獲卵數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、妊娠率往往較低。如何安全的獲取高質(zhì)量、高效率的卵母細胞是目前研究的難點及熱點。
　　 卵泡的發(fā)育和卵母細胞的成熟過程受到多種因素的調(diào)控。卵母細胞與其周圍顆粒細胞及顆粒細胞與顆粒細胞之間通過間隙連接蛋白介導的細胞間通訊進行著營養(yǎng)、代謝物質(zhì)的傳遞和信號的傳導。間隙連接蛋白43(Connexin43，Cx43)是卵泡發(fā)育過程中最重要的連接蛋白。目前關于Cx43在卵泡發(fā)育過程中的作用主要集中于動

3、物方面的研究，在人類方面研究甚少。在人類輔助生殖助孕過程中，有學者研究卵丘細胞Cxs表達量的高低與助孕結局的關系，目前結果尚有爭議。本文旨在研究壁層顆粒細胞和卵丘細胞Cx43表達量的差異，分析其與體外受精-胚胎移植結局的關系，判斷其對卵母細胞質(zhì)量及胚胎發(fā)育潛能的預測價值。
　　 方法：
　　 收集2012年10月～2013年1月在鄭州大學第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學中心行IVF-ET助孕治療的患者壁層顆粒細胞32例，行ICSI助

4、孕患者卵丘細胞25例。均采用我中心常規(guī)長方案，于月經(jīng)黃體中期降調(diào)節(jié)，在促排過程中動態(tài)監(jiān)測血清E2、P、LH變化及卵泡發(fā)育情況，及時調(diào)整Gn用量，適時注射HCG，36～37h后陰道超聲引導下行穿刺取卵術。體外授精后培養(yǎng)72h進行胚胎移植，同時給予黃體酮、達芙通進行黃體支持治療。胚胎移植后14、18天抽血查血β-HCG，陽性且移植后35天腹部B超宮內(nèi)見孕囊者為臨床妊娠。按妊娠與否分為妊娠組和非妊娠組。應用實時熒光定量PCR技術分別測定壁層顆

5、粒細胞、卵丘細胞上Cx43在mRNA水平的表達;應用免疫細胞化學技術測定壁層顆粒細胞上Cx43在蛋白水平的表達。分別比較妊娠組與非妊娠組其表達量的差異。采用免疫熒光染色檢測Cx43在壁層顆粒細胞上的表達及表達部位。
　　 結果：
　　 1.妊娠組壁層顆粒細胞中Cx43mRNA及蛋白水平表達均低于非妊娠組，差異有統(tǒng)計學意義(1.00(0.50，2.08)vs.2.30(1.77，6.90)，P＜0.05;114.72±12

6、.40vs.147.54±18.91,P＜0.05)。
　　 2.妊娠組卵丘細胞中Cx43mRNA表達與非妊娠組比較，差異無統(tǒng)計學意義(1.68(0.99,3.13)vs.2.34(1.01,3.95),P＞0.05)。
　　 3.壁層顆粒細胞中Cx43mRNA表達與受精率、卵裂率負相關(r=-0.482，P＜0.05;r=-0.453,P＜0.05)。
　　 結論：
　　 Cx43主要在人卵巢壁層顆粒細