Barrett食管治療的臨床和實驗研究.pdf

1、背景：Barrett食管的腸化生是一種癌前病變。目前阻止Barrett食管癌變發(fā)生的主要方法是強效制酸劑和非類固醇抗炎藥(COX-2抑制劑)的應(yīng)用。然而,由于傳統(tǒng)NSAIDs藥物的嚴重的不良反應(yīng)以及現(xiàn)有核酶、反義RNA等基因干預(yù)手段的低效率性、特異性及作用時間短暫等缺陷,極大的限制了它們在抑制Barrett食管癌變過程中的應(yīng)用。RNA干擾技術(shù)作為一種新型的轉(zhuǎn)錄后基因干預(yù)手段,它的出現(xiàn)為研究內(nèi)源性基因功能及信號通路提供了強有力的研究工具。

2、為此,我們設(shè)想采用這種基因干預(yù)方法研究COX-2在Barrett食管癌變過程中的作用,進而為阻斷Barrett食管轉(zhuǎn)變?yōu)橄侔┨峁┮粋€新的方向。
　　 第一部分
　　 目的：設(shè)計、構(gòu)建和鑒定慢病毒介導的COX2基因RNAi質(zhì)粒。方法：①慢病毒介導的COX2基因的RNAi質(zhì)粒制備；②RNAi慢病毒包裝；③western Blot篩選RNA干擾有效靶點。結(jié)果：①經(jīng)PCR鑒定和測序驗證,成功構(gòu)建慢病毒介導的COX2基因RNAi質(zhì)

3、粒；②RNAi慢病毒包裝成功,病毒滴度測定結(jié)果為5×107～4×108TU/ml；③經(jīng)Western Blot篩選出有效COX2基因RNAi靶點。結(jié)論：構(gòu)建成功慢病毒介導的COX2基因RNAi質(zhì)粒,并能有效敲減SEG細胞中COX2基因的表達。
　　 第二部分：
　　 目的：對內(nèi)鏡下冷凍(Cryotherapy)治療Barrett′s esophagus(BE)的療效進行前瞻性評估。方法：選擇我院2008年1月-2009年

4、5月經(jīng)胃鏡檢查、病理證實的22例BE患者進行內(nèi)鏡下二氧化碳冷凍治療,對其治療效果、療程和并發(fā)癥進行評估。結(jié)果：22例患者中有2例中途退出,其余20例通過一次或多次冷凍消融均取得BE黏膜的組織學完全逆轉(zhuǎn)和內(nèi)鏡下的有效逆轉(zhuǎn)(100％),其中9例(45％)獲得內(nèi)鏡下完全逆轉(zhuǎn)。6個月后出現(xiàn)3例復發(fā),其中2例為隱性腸化生,BE黏膜的總逆轉(zhuǎn)率為85％。整個研究(包括2例失訪者)共完成44次冷凍治療,平均2.1次/人,僅1例發(fā)生食管潰瘍,3例發(fā)生中、

5、重度食管炎,予藥物治療后均愈合。結(jié)論：內(nèi)鏡下二氧化碳冷凍治療BE安全有效,近期療效顯著。
　　 第三部分：
　　 目的：對氬離子凝固術(shù)(Argon plasma coagulation,APC)合并質(zhì)子泵抑制劑(PPI)治療逆轉(zhuǎn)Barrett食管的長期療效進行評估。方法：選擇本院2004年至2007年經(jīng)胃鏡檢查、病理證實為Barrett食管的36例患者(男性25例,女性11例)進行功率為60W APC聯(lián)合PPI(20mg

6、/d)治療,分別于治療后第1,6,12個月行內(nèi)鏡復查,以后每年一次內(nèi)鏡隨訪。結(jié)果：APC治療共53次,平均燒灼次數(shù)為1.47次/人,患者經(jīng)APC+PPI治療后BE完全逆轉(zhuǎn)率為100％,1次APC治療總有效率為75.0％(27/36),2次為94.4％(27+7/36)。1例(為長段BE)治療3次,另1例(長度為5.5厘米)共進行4次APC治療,均實現(xiàn)完全逆轉(zhuǎn),內(nèi)鏡下仍可見少量島狀粘膜,但病理陰性。治療后33.3％(12/36)的患者出現(xiàn)