α1腎上腺素受體亞型選擇性拮抗劑YM0301對映體抗良性前列腺增生癥作用的實驗研究.pdf

1、研究背景和目的：
　　良性前列腺增生癥（benign prostatic hyperplasia, BPH）是由前列腺尿道周圍區(qū)細(xì)胞的良性腺瘤性增生而引起的中老年男性的常見病、高發(fā)病，其發(fā)病率隨著年齡的增長而增加。隨著全球社會人口老齡化的到來，其龐大的患者人群以及高昂的醫(yī)療費用已經(jīng)成為一種嚴(yán)峻的社會問題，也成為全球性關(guān)注的公共健康問題。患者隨著前列腺移行區(qū)細(xì)胞的增生，體積不斷增大的前列腺壓迫前列腺部尿道，引起尿動力學(xué)上的膀胱出口梗

2、阻（bladder outlet obstruction，BOO），而表現(xiàn)出包括儲尿期、排尿期及排尿后的下尿路癥狀（lower urinary tract symptoms，LUTS），臨床表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿失禁和夜尿增多等刺激癥狀，以及尿流細(xì)、排尿躊躇、尿滴瀝和尿潴留等梗阻癥狀。對于前列腺增生引起的尿路梗阻及膀胱刺激等下尿路癥狀的治療，α?1-腎上腺素受體拮抗劑由于舒張前列腺平滑肌細(xì)胞，以達(dá)到緩解尿路梗阻的目的而成為目前公認(rèn)的治療B

3、PH及其引起的LUTS和膀胱流出道梗阻的首選藥。
　　雖然α1-腎上腺素受體阻滯劑其治療BPH的效果得到肯定。但由于α1-腎上腺素受體廣泛分布于機(jī)體的各種器官、組織和細(xì)胞，不同組織細(xì)胞上的?1-腎上腺素受體的藥理學(xué)特性并不均一,并存在?1A、?1B和?1D多種亞型。對于BPH患者，其下尿路膀胱頸、前列腺包膜及增生的前列腺基質(zhì)中的平滑肌主要以?1A和?1D腎上腺素受體亞型為主。因此研制超選擇性阻滯?1A和或?1D及高尿路選擇性的?1

4、腎上腺素受體亞型選擇性拮抗劑是目前有效治療BPH的關(guān)鍵。
　　YM0301對映體是廣州醫(yī)學(xué)院藥物研究中心設(shè)計、合成的一對全新化合物，具有選擇性拮抗?1A/D受體的作用，是一種新型的?1-腎上腺素受體阻滯劑，具有潛在治療前列腺增生癥的作用。本研究主要以YM0301一對對映體（簡稱為YM0301-A及YM0301-B）及YM0301外消旋體（簡稱為YM0301）為研究對象，建立一系列前列腺增生的動物模型，從離體組織到體內(nèi)、外整體動物評

5、價YM0301-A及YM0301-B治療前列腺增生癥的作用及可能機(jī)制，并對其安全性初步評估，以期為尋找具有潛在治療BPH的手性藥物提供實驗依據(jù)。
　　研究內(nèi)容和方法：
　　1、采用離體組織肌條舒張作用實驗，計算 pA2值，比較 YM0301-A、YM0301-B及YM0301對?1腎上腺素受體三種亞型的作用特性及對下尿路組織的功能選擇性作用。
　　2、采用測定正常大鼠血壓及膀胱內(nèi)壓的實驗，比較 YM0301-A、YM0

6、301-B及YM0301對正常大鼠血壓及充盈性膀胱內(nèi)壓的影響。
　　3、建立丙酸睪酮皮下注射致去勢大鼠前列腺增生模型動物，灌胃給藥4周后，通過組織形態(tài)學(xué)、宏觀及微觀測量和免疫組化方法，探討YM0301-A及YM0301-B對丙酸睪酮致大鼠良性前列腺增生的治療作用及可能機(jī)制。
　　4、復(fù)制大鼠下尿路部分狹窄導(dǎo)致膀胱泌尿功能障礙的動物模型，造模2W后連續(xù)灌胃給藥4周，用充盈性膀胱測壓的方法觀察YM0301-A及YM0301-B對

7、膀胱泌尿功能的影響及可能的作用機(jī)制。
　　5、復(fù)制胎鼠尿生殖竇植入誘導(dǎo)大鼠前列腺間質(zhì)增生動物模型，復(fù)制模型3天后連續(xù)灌胃給藥4周，通過組織形態(tài)學(xué)、宏觀及微觀測量方法，探討YM0301-A及YM0301-B對大鼠前列腺間質(zhì)增生的治療作用及可能機(jī)制。
　　6、通過小鼠急性毒性實驗及體外致突變Ames試驗（平板摻入法），考察YM0301-A及YM0301-B的安全性。
　　研究結(jié)果：
　　1、YM0301-A、YM03

8、01-B及YM0301均為競爭性?1腎上腺素受體亞型選擇性拮抗劑，選擇性作用于?1A及?1D受體亞型。其中 YM0301-A選擇性及內(nèi)在活性較YM0301-B及YM0301強，對?1D的作用比?1B強22倍， YM0301-A對?1A及?1D的高選擇性作用相對較強。YM0301-A、YM0301-B及YM0301對下尿路組織前列腺肌條、膀胱肌條及尿道環(huán)等有較高活性，有一定的選擇性，并對下尿路組織具有泌尿組織選擇性。YM0301-A對主動

9、脈/門靜脈的活性差異，表明YM0301-A在治療前列腺增生癥方面可能具有相對較低的潛在的心血管副作用的優(yōu)勢。
　　2、YM0301-A及YM0301-B是?1受體亞型選擇性拮抗劑，并對血管、泌尿組織有一定的選擇性。體內(nèi)對血壓的影響結(jié)果表明，YM0301-A及 YM0301-B間對血壓的影響亦有選擇性，從YM0301-A、YM0301-B及YM0301對心血管系統(tǒng)的作用強度比較，YM0301-B對血管的舒張作用明顯強于YM0301-

10、A，而YM0301作用居中。在對麻醉大鼠膀胱排尿功能的實驗結(jié)果表明，YM0301-A對麻醉正常大鼠膀胱壓閾值變化率及膀胱排尿壓的變化率不大，只是輕微延長排尿間隔；YM0301-B隨著劑量的加大，其對麻醉正常大鼠膀胱壓閾值變化率及膀胱排尿壓的變化率較大，顯著延長排尿間隔；而YM0301的作用介于兩者之間。
　　3、YM0301-A及YM0301-B對丙酸睪酮致大鼠良性前列腺增生具有抑制作用，并能改善膀胱的病理改變和泌尿功能。其抑制前

11、列腺增生的作用與降低前列腺腺腔上皮高度、腺腔上皮體積、前列腺間質(zhì)體積、前列腺腺腔平均周長及腺腔平均體積有關(guān)，總體上表現(xiàn)為前列腺重量和體積的降低。另外，YM0301-A及YM0301-B抑制大鼠前列腺間質(zhì)組織的增生與其抑制前列腺間質(zhì)中?-SMA的表達(dá)有關(guān)，YM0301-A抑制前列腺增生的作用比YM0301-B強。
　　4、YM0301-A、YM0301-B及YM0301通過降低排尿后壓力，提高有效排尿率而改善排尿功能，其中YM030

12、1-A抑制膀胱、輸尿管及腎器官指數(shù)的增長作用最明顯，并能通過抑制膀胱肌層膠原的沉積而延緩或阻滯膀胱病變，改善或保護(hù)膀胱功能。其次，膀胱泌尿功能的改善與YM0301-A顯著降低逼尿肌的自主收縮有關(guān)。
　　5、YM0301-A及YM0301-B對尿生殖竇植入法致大鼠前列腺增生有一定的治療作用。YM0301-A抑制前列腺增生的作用強于YM0301-B，表現(xiàn)在微觀上降低前列腺腺腔上皮高度、腺腔上皮體積、前列腺間質(zhì)體積、前列腺腺腔平均周長及

13、腺腔平均體積，宏觀上降低前列腺腹葉濕重指數(shù)、體積指數(shù)而抑制前列腺增生；組織形態(tài)學(xué)顯示，YM0301-A明顯減緩前列腺上皮細(xì)胞增生及間質(zhì)增生，一定程度抑制了前列腺增生的病理變化；其次，YM0301-A抑制間質(zhì)?-SMA特異表達(dá)蛋白的作用強于YM0301-B。
　　6、小鼠急性毒性實驗表明，YM0301-A、YM0301-B及YM0301小鼠口服給藥LD50（mg/kg）分別為：2248.6mg/kg、1085.4 mg/kg及135

14、1.6mg/kg，都超過1000 mg/kg（小鼠），若以臨床上擬推薦人用每天最大劑量（75mg/60kg)，經(jīng)換算后已相當(dāng)于人用劑量的近128倍，因此可以說本藥物是相當(dāng)安全的。在致突變實驗中， YM0301-A、YM0301-B及YM0301在Ames實驗中均為陰性結(jié)果，表明該化合物在正常劑量下沒有明顯的遺傳毒性。
　　研究結(jié)論：
　　YM0301-A、YM0301-B及YM0301均為競爭性?1腎上腺素受體亞型選擇性拮抗

15、劑，對下尿路組織具有泌尿組織選擇性。其可通過抑制前列腺增生、改善膀胱泌尿功能而達(dá)到治療良性前列腺增生癥的作用。其中，YM0301-A具有相對較高的對下尿路組織選擇性及較弱的血管作用，推測YM0301-A在治療前列腺增生癥方面可能具有相對較強的治療作用及較低的心血管副作用的優(yōu)勢。
　　創(chuàng)新點：
　　1、建立了離體組織方法進(jìn)行手性藥理學(xué)研究。
　　2、建立了多種前列腺增生的疾病動物模型，從不同層次、多角度較全面地評價了YM