性激素受體在良性前列腺增生癥中的發(fā)病機制研究.pdf

1、背景：良性前列腺增生癥(benign prostatic hyperplasia，BPH)是一種常見于老年男性的由前列腺移行區(qū)上皮和基質良性增生造成膀胱出口梗阻，從而引起患者一系列下尿路癥狀的良性疾病，其發(fā)病率與年齡呈正相關。目前我國即將進入老齡化社會，由BPH帶來的衛(wèi)生經(jīng)濟學壓力更加嚴峻。目前認為BPH是一種由多因素參與的具有復雜發(fā)病機制的疾病，到目前為止其確切發(fā)病機制及病因仍不清楚。于是明確BPH的確切發(fā)病機制將有可能發(fā)現(xiàn)更加有效的

2、預防及治療方案，對提高老年男性的生活質量、減少社會醫(yī)療保障負擔具有重要的意義。
　　目的：本研究針對性激素受體包括雄激素受體(AR)、雌激素受體α(ERα)、雌激素受體β(ERβ)和孕激素受體(PGR)在BPH中的可能機制做一探索性研究，期望能找到一個突破口。鑒于BPH的可能發(fā)病機制的多因素性，在明確上述性激素受體在BPH組織中的確切表達變化后，擬從可能參與性激素受體mRNA調控的microRNAs、可能受性激素受體調控且與細胞增

3、殖或凋亡相關的細胞因子和生長因子、代謝綜合征與性激素受體的相關性等多方面進行探索，在研究過程中根據(jù)實驗發(fā)現(xiàn)結果及時調整方案，為進一步深入研究并揭示性激素受體在BPH中的確切發(fā)病機制提供一定的思路。
　　方法：
　　1.收集2015年2月～2015年6月在第三軍醫(yī)大學第一附屬醫(yī)院泌尿外科住院并行手術治療且病例資料完整的BPH病例40例，同時收集器官捐獻者以及其他手術切除前列腺并通過病理診斷明確為正常前列腺的病例5例。
　

4、　2.通過聯(lián)合丙酸睪酮和苯甲酸雌二醇誘導去勢SD雄性大鼠建立大鼠BPH模型。
　　3.聯(lián)合使用IHC、qRT-PCR和WB的方法確定性激素受體包括AR、ERα、ERβ和PGR在BPH組織中較正常前列腺組織的表達差異，然后采用同樣方法檢測大鼠BPH模型組織中這些受體的表達差異變化。
　　4.通過芯片檢測初步了解及篩查BPH組織中miRNAs是否存在異常表達，然后通過qRT-PCR的方法對miRNAs表達芯片提示可能具有異常表達

5、的miRNAs的確切表達進行驗證。
　　5.采用qRT-PCR的方法檢測BPH組織中可能受性激素受體調控且有可能與BPH發(fā)病相關的細胞因子、生長因子在轉錄水平的表達差異情況。
　　6.根據(jù)MetS的診斷標準對納入研究的 BPH病例進行分組，分為BPH伴MetS組和BPH不伴MetS組，并對比分析兩組間臨床資料差異性明確MetS與BPH的相關性，然后使用qRT-PCR及WB的研究方法明確兩組各性激素受體的表達差異情況。

6、　　結果：
　　1.在人BPH組織中AR和PGR表達顯著升高，ERα的表達顯著下降；大鼠BPH模型實驗組中PGR的表達顯著上調，AR和ERα的表達顯著下調；ERβ的表達未見顯著性差異；IHC、qRT-PCR、WB在檢測上述性激素受體表達的結果一致。
　　2.miRNAs芯片檢測結果發(fā)現(xiàn)發(fā)現(xiàn)miR-126-3p和miR-4672在BPH組織中表達下調具有統(tǒng)計學意義，但是qRT-PCR的驗證結果未見miR-126-3p、miR-

7、4672、miR-143-3p和miR-145-3p在BPH組織中和正常前列腺組織中的表達具有顯著性差異。
　　3.采用qRT-PCR方法檢測發(fā)現(xiàn)ETV1、TLR1基因轉錄水平的表達在BPH組織中顯著性上調，而TGFβ1-SMAD2/3、IL6R-JAK2-STAT3、KRAS-ERK、TLR2基因的轉錄水平表達在BPH組織和正常前列腺組織中的差異無統(tǒng)計學意義。
　　4.BPH不伴MetS組與BPH伴MetS組的臨床資料分析

8、：兩組之間年齡相仿；在代謝綜合征相關各診斷因素上，如BMI、空腹血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白、血壓，兩組間具有顯著性差異(P＜0.05)；在BPH相關的檢查檢驗結果方面，國際前列腺癥狀評分以及最大尿流率在兩組間的差異并無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，但總前列腺特異性抗原和前列腺體積在BPH伴MetS組顯著性升高(P＜0.05)；組織炎癥情況對比方面，BPH不伴MetS組內的患者前列腺組織炎癥檢出率為46.7％(7/15)，而BPH伴Met

9、S組的患者前列腺組織炎癥檢出率為76.2%(16/21)，但該差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；采用qRT-PCR和WB法的檢測發(fā)現(xiàn)在伴有MetS的BPH患者的前列腺組織中AR、ERα和PGR在轉錄水平和蛋白水平的表達均顯著性升高(P＜0.05)，而ERβ的表達在兩組間未見顯著性差異(P＞0.05)。
　　結論：
　　1.證實了BPH組織中AR和PGR的表達上調以及ERα的表達下調。推測在BPH中AR和PGR具有誘導疾病起病

10、、促進疾病進展的作用，而ERα則具有抑制作用。激素誘導大鼠BPH模型與人BPH中雄激素/AR通路的活化機制具有差異性。
　　2.就目前該研究的數(shù)據(jù)來看，尚不能認為miRNAs與BPH組織中性激素受體的異常表達具有相關性，也不能認為miRNAs在BPH發(fā)病機制中具有顯著的作用。在篩查BPH組織中miRNAs差異表達方面需要靈敏度和特異度更高的實驗方法，同時需要擴大正常前列腺樣本量繼續(xù)驗證以排除樣本偏倚的影響。
　　3.通過目前

11、所得到的實驗數(shù)據(jù)，發(fā)現(xiàn)BPH組織中ETV1、TLR1基因在轉錄水平的表達較正常前列腺組織顯著性上調，而其余所檢測的因子在轉錄水平表達則無統(tǒng)計學意義。但是尚不能就此實驗結果予以下結論，還需要進一步研究明確這些因子蛋白水平及蛋白磷酸化水平的變化。初步推測AR-ETV1通路可能與BPH的發(fā)病具有相關性，也是我們深入研究的可能方向。
　　4.證實了MetS和BPH的相關性，伴有MetS的BPH的患者前列腺總體積更大、血清PSA水平更高、組