基于SSR熒光標(biāo)記和毛細(xì)管電泳檢測技術(shù)的我國煙草審(認(rèn))定品種遺傳多樣性研究.pdf

1、煙草(Tobacco)作為一種重要的經(jīng)濟(jì)作物,經(jīng)過自然條件和人工選擇培養(yǎng),以及不斷地從國外引進(jìn),在我國已形成了豐富多彩的品種資源。從1986年開始對煙草品種實行審(認(rèn))定制度以來,到2010年為止,我國全國煙草品種審定委員會共審定(或認(rèn)定)91個煙草品種,這些良種的推廣和應(yīng)用對我國煙草生產(chǎn)起到了積極的推進(jìn)作用。本實驗基于SSR熒光標(biāo)記與毛細(xì)管電泳檢測技術(shù),建立了一套高通量煙草品種SSR標(biāo)記檢測體系,并用建立的技術(shù)體系研究我國主要審(認(rèn))

2、定煙草種質(zhì)資源的遺傳多樣性及親緣關(guān)系,為煙草育種的親本選配和有利基因利用提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.本實驗基于SSR熒光標(biāo)記與毛細(xì)管電泳檢測技術(shù),通過調(diào)整PCR各反應(yīng)成分的量以及循環(huán)條件,最終確立了一套適合Beckman CEQ8000全自動遺傳分析系統(tǒng)的PCR擴(kuò)增及檢測體系。對毛細(xì)管電泳熒光檢測技術(shù)和聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)檢測結(jié)果的比較表明,熒光檢測法克服了銀染法的不足,具有簡便、可靠及高通量的優(yōu)點。同時對微衛(wèi)

3、星熒光標(biāo)記技術(shù)中低成本、高通量多重PCR體系建立的一些技術(shù)問題進(jìn)行了探討。
　　 2.選取36對SSR引物對71份審(認(rèn))定煙草種質(zhì)進(jìn)行SSR擴(kuò)增,共產(chǎn)生2437條DNA帶,其中多態(tài)性帶為205條；平均每對引物能夠擴(kuò)增出2～15條,平均多態(tài)性檢出率為8.4％。表明SSR技術(shù)在煙草種質(zhì)資源遺傳多樣性分析中的高效性。
　　 3.基于Dice遺傳相似系數(shù)的UPGMA聚類分析,結(jié)果表明,在聚類閥值為0.35處,烤煙與白肋煙各自成