碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白及其靶基因在非酒精性脂肪肝發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、目的：
　　 以高糖飲食構(gòu)建大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型,通過(guò)對(duì)不同時(shí)間點(diǎn)大鼠肝組織中ChREBP及其靶基因ACC、FAS的mRNA表達(dá)和蛋白水平,ChREBP與ACC、FAS基因啟動(dòng)子碳水化合物應(yīng)答元件(ChRE)結(jié)合情況的檢測(cè),以探討ChREBP及其靶基因ACC、FAS在高糖大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　 方法：
　　 選取SD大鼠32只,隨機(jī)分為對(duì)照組和高糖組。高糖組于4、

2、8、12周末處死,對(duì)照組于12周末處死。每組在處死前禁食12小時(shí)后腹主動(dòng)脈采血檢測(cè)甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),HE染色觀察肝臟脂肪變性,RT-PCR和Western blot方法測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)大鼠肝臟組織中ChREBP、ACC、Fan的mRNA表達(dá)和蛋白水平,染色質(zhì)免疫共沉淀的方法分析不同時(shí)間點(diǎn)ChREBP與ACC、FAS基因啟動(dòng)子碳水化合物應(yīng)答元件(ChRE)結(jié)合情況。
　　

3、 結(jié)果：
　　 成功構(gòu)建高糖飲食大鼠NAFLD模型,隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng),血清生化(TG、、TC、ALT、AST)指標(biāo)顯著升高(P＜0.01),肝脂肪程度不斷加重,第4、8和12周末高糖組大鼠肝組織ChREBP、ACC、FanmRNA、蛋白及ChREDNA的表達(dá)水平,與對(duì)照組差異顯著(P＜0.01),且隨造模時(shí)間延長(zhǎng),其表達(dá)量顯著增加。
　　 結(jié)論：
　　 高碳水化合物飲食可增強(qiáng)ChREBP的表達(dá),而ChREBP通