HNRPDL在腫瘤細(xì)胞中的功能研究.pdf

1、目的：研究HNRPDL（Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein D-like）在結(jié)腸癌及慢性髓細(xì)胞白血?。–hronic myeloid leukemia，CML）細(xì)胞中的功能。
　　方法：⑴構(gòu)建過(guò)表達(dá)HNRPDL和干擾其表達(dá)的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體并制備病毒侵染SW620、K562等腫瘤細(xì)胞，Q-RT-PCR和western blot檢測(cè)HNRPDL的表達(dá)情況；⑵干預(yù)HNRPDL表達(dá)后研究它對(duì)細(xì)胞

2、增殖、遷移、周期、集落生成和致瘤能力的影響；⑶使用K562細(xì)胞研究HNRPDL對(duì)其伊馬替尼（Imatinib mesylate，IM）反應(yīng)性的影響；⑷在BaF3細(xì)胞中共表達(dá)BCR/ABL和HNRPDL，比較共表達(dá)與單獨(dú)表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖和集落生成的影響。
　　結(jié)果：①結(jié)腸癌樣本中HNRPDL的表達(dá)明顯高于對(duì)照樣本。干擾HNRPDL的表達(dá)后，結(jié)腸癌細(xì)胞SW620的增殖、集落生成和遷移能力減弱，且在裸鼠皮下成瘤能力也降低（對(duì)照組：8/8；

3、HNRPDL沉默組：5/8）。②細(xì)胞周期分析顯示：干擾HNRPDL表達(dá)的SW620細(xì)胞與對(duì)照相比G0/G1期細(xì)胞增加，G2/M期細(xì)胞減少。③Western blot分析顯示HNRPDL沉默抑制SW620細(xì)胞中cyclin D3的表達(dá)。④慢性髓細(xì)胞白血病患者骨髓中HNRPDL的表達(dá)較正常骨髓顯著升高；沉默HNRPDL顯著抑制CML細(xì)胞株（K562、MEG-01和BV173）和患者CD34+細(xì)胞的生長(zhǎng)；也顯著抑制了MEG-01細(xì)胞的裸鼠皮下

4、成瘤能力（對(duì)照：6/8；shHNRPDL＃1：1/8；shHNRPDL#2組：0/8）。⑤過(guò)表達(dá)HNRPDL促進(jìn)BaF3細(xì)胞的生長(zhǎng)及集落生成能力，并且能夠減少BaF3細(xì)胞對(duì)mIL-3的依賴(lài)。HNRPDL也增強(qiáng)K562細(xì)胞的體外增殖。HNRPDL和BCR/ABL共表達(dá)細(xì)胞的生長(zhǎng)較單獨(dú)基因表達(dá)細(xì)胞顯著增強(qiáng)。⑥HNRPDL沉默增加細(xì)胞對(duì)IM的敏感性，而過(guò)表達(dá)HNRPDL增加細(xì)胞對(duì)IM的耐受性。
　　結(jié)論：⑴HNRPDL在結(jié)腸癌樣本中異常