按摩干預(yù)單純性肥胖大鼠能量代謝平衡紊亂的機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　本研究通過(guò)按摩治療單純性肥胖大鼠，以腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信號(hào)通路為研究主線，探討按摩干預(yù)單純性肥胖大鼠能量代謝平衡紊亂的機(jī)制。進(jìn)一步揭示按摩力學(xué)刺激防治肥胖的醫(yī)學(xué)原理，補(bǔ)充和完善中醫(yī)外治方法治療單純性肥胖機(jī)制的基礎(chǔ)研究。
　　方法:
　　雄性SD大鼠共60只，將大鼠隨機(jī)分為普通飲食組（10只）、高脂飲食組（50只）。普通飲食組給予普通飼料，高脂飲食組給予高脂飼料。連續(xù)喂養(yǎng)9周后，將高脂飲食組中體重

2、大于普通飲食組體重120％者定為肥胖大鼠。普通飲食組入正常對(duì)照組（8只），高脂飲食組中滿足肥胖條件的大鼠隨機(jī)分配入模型對(duì)照組（8組）、按摩治療組（8只）、抑制劑組（8只）。從造模成功后的第一天起，對(duì)按摩治療組大鼠進(jìn)行按摩治療，共治療2周，每天1次，每次10分鐘，治療部位集中在腹部、側(cè)腹部、腹股溝處;對(duì)抑制劑組大鼠，每日腹腔注射AMPK抑制劑(compound C)進(jìn)行干預(yù)，共2周;其余兩組不做處理。各組大鼠每天稱重1次，并對(duì)大鼠飲水量、

3、攝食量等一般情況進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。治療2周后，測(cè)量各組大鼠體長(zhǎng)，計(jì)算Lee's指數(shù);于第15天處死大鼠，取大鼠腎周、睪周和腰周部位脂肪并稱重，計(jì)算體脂率;采血、分離血清，斷頭取腦，分離下丘腦;檢測(cè)大鼠血糖血脂，運(yùn)用酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清瘦素及瘦素受體表達(dá)水平，運(yùn)用免疫組化方法測(cè)定下丘腦瘦素及瘦素受體表達(dá)水平，運(yùn)用逆轉(zhuǎn)錄PCR方法測(cè)定下丘腦與脂肪組織腺苷酸激活蛋白激酶基因表達(dá)水平(AMPK mRNA)，運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡法方法檢測(cè)下丘腦與脂肪組織腺苷

4、酸激活蛋白激酶(AMPK)蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　(1)動(dòng)物模型情況:①連續(xù)喂養(yǎng)9周，高脂飲食組中共有40只大鼠體重明顯高于普通飲食組120％，差異明顯(p＜0.05)，造模成功。②模型對(duì)照組大鼠Lee's指數(shù)、脂肪濕重、體脂率以及血甘油三酯均超過(guò)正常對(duì)照組(p＜0.05)。③模型對(duì)照組大鼠血清瘦素及血清瘦素受體含量比正常對(duì)照組增多(p＜0.05)。④模型對(duì)照組大鼠脂肪組織及下丘腦AMPKα1、α2 mRNA表達(dá)比正

5、常對(duì)照組下調(diào)明顯(p＜0.05)⑤模型對(duì)照組大鼠脂肪組織p-AMPKα2表達(dá)比正常對(duì)照組下調(diào)(p＜0.05)，模型對(duì)照組大鼠下丘腦AMPK蛋白表達(dá)比正常對(duì)照組下調(diào)(p＜0.05)。
　　(2)按摩治療單純性肥胖結(jié)果:治療后，在體重、Lee's指數(shù)、脂肪濕重、體重率、血甘油三酯指標(biāo)上，按摩治療組均低于模型對(duì)照組，差異明顯(p＜0.05)。
　　(3)抑制劑干預(yù)單純性預(yù)肥胖結(jié)果:治療后，體重、Lee's指數(shù)、脂肪濕重、體重率、血

6、甘油三酯指標(biāo)上，抑制劑組低于模型對(duì)照組，差異明顯(p＜0.05)。
　　(4)按摩治療單純性肥胖機(jī)制研究結(jié)果:按摩治療組大鼠血清瘦素及血清瘦素受體含量比模型對(duì)照組有所下降(p＜0.05)，按摩治療組大鼠脂肪組織AMPKα2 mRNA表達(dá)比模型對(duì)照有所上調(diào)(p＜0.05)，但按摩治療組大鼠下丘腦組織AMPKα2 mRNA表達(dá)與模型對(duì)照比較，差異不明顯，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　(1)單純性肥胖大鼠經(jīng)

7、過(guò)按摩治療，在體重、Lee's指數(shù)、脂肪濕重、體重率、甘油三酯指標(biāo)上，按摩治療組與模型對(duì)照組比較，下調(diào)明顯，并且在一定程度上調(diào)整機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂，說(shuō)明按摩治療肥胖療效確切。
　　(2)通過(guò)設(shè)置抑制劑組，并與模型組比較，也能達(dá)到減肥的效果，說(shuō)明AMPK信號(hào)通路是調(diào)控機(jī)體能量代謝平衡的核心環(huán)節(jié)。
　　(3)按摩治療單純性肥胖的機(jī)制可能在于激活外周（脂肪組織）AMPK，開(kāi)啟代謝途徑，減緩瘦素抵抗，調(diào)整機(jī)體能量代謝紊亂，從而到達(dá)減肥