SIRT1對(duì)大鼠心肌缺血再灌注時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡的影響及ERK1-2通路的作用.pdf

1、目的：
　　研究在體大鼠心肌缺血再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）時(shí)沉默信息調(diào)節(jié)因子1（silent information regulator1,SIRT1）對(duì)心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡的影響及其與細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular signal-regulated kinase1/2，ERK1/2）信號(hào)通路的關(guān)系。
　　方法：
　　SD大鼠72只，雄性，體重200~250 g，隨機(jī)

2、分為6組（n=12）：假手術(shù)組(control組),缺血再灌注組（I/R組），白藜蘆醇+缺血再灌注組（Res+I/R組）,白藜蘆醇+EX527(1μg/kg)+缺血再灌注組（ Res+EX+IR組），白藜蘆醇（10mg/kg）+PD98059(0.3mg/kg)+缺血再灌注組（Res+PD+IR組），PD98059+缺血再灌注組（PD+IR組）。大鼠冠狀動(dòng)脈左前降支，結(jié)扎30min,再灌注2h,建立大鼠心肌缺血再灌注損傷模型,藥物經(jīng)尾靜

3、脈注射。原位末端標(biāo)記法檢測心肌細(xì)胞凋亡；比色法檢測LDH、CK-MB活性。實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）法檢測心肌葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白（glucose-regulated protein78,GRP78）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)和CCAAT/增強(qiáng)子結(jié)合蛋白同源蛋白(CCAAT/C/EBP homologous

4、protein, CHOP) mRNA的表達(dá);Western印跡檢測SIRTl、Caspase-12、CHOP、磷酸化ERK1/2和總ERK1/2蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1. Res+I/R組與I/R組相比，心肌凋亡指數(shù)降低（P<0.05），血清 LDH及 CK-MB活性降低，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)凋亡的指標(biāo) GRP78、caspase-12及CHOP的蛋白表達(dá)量和mRNA均降低（ P<0.05）;給予SIRT1抑制劑EX52

5、7后與Res+I/R組相比，以上指標(biāo)升高(P<0.05)。
　　2、Res+I/R組與I/R組相比， SIRT1及磷酸化ERK1/2蛋白的表達(dá)量均增加（ P<0.05），而 Res+EX+I/R組與 Res+I/R組相比， SIRT1、磷酸化ERK1/2蛋白的表達(dá)量又降低（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、SIRT1能夠抑制大鼠在體缺血再灌注心肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)，發(fā)揮保護(hù)心肌的作用。
　　2、SIR