1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖侵襲遷移的研究.pdf

1、目的：
　　探討1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑對(duì)人胃癌細(xì)胞SGC-7901細(xì)胞增殖、遷移和侵襲的影響及機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1、MTT法：檢測(cè)藥物對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制效果，分別設(shè)四個(gè)組：即對(duì)照組（等體積PBS溶液）、1-甲基乙內(nèi)酰脲(M組)、順鉑(DDP)、1-甲基乙內(nèi)酰脲(M)與順鉑(DDP)聯(lián)合組。通過(guò)予以1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥及不同濃度的處理，檢測(cè)24h、48h、72h

2、后藥物對(duì)胃癌 SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制作用。
　　2、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)：檢測(cè)1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞遷移能力的影響；
　　3、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)：檢測(cè)1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　4、RT-PCR實(shí)驗(yàn)：檢測(cè)1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞中MMP9、CD44V6 mRNA表達(dá)影響。
　　5、We

3、stern-blotting檢測(cè)：1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑、和兩者聯(lián)合用藥對(duì)SGC-7901細(xì)胞MMP9、CD44V6蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：
　　1. MTT分析法檢測(cè)結(jié)果顯示：
　?、?-甲基乙內(nèi)酰脲和順鉑在0.5-80 umol/L的濃度范圍內(nèi)均能抑制SGC-7901細(xì)胞的增殖，其抑制率呈時(shí)間、濃度依賴關(guān)系，隨著濃度或作用時(shí)間的增加抑制率增加。
　　②1-甲基乙內(nèi)酰脲單獨(dú)作用時(shí)，與對(duì)照組相比，各處理組均

4、能抑制SGC-7901細(xì)胞增殖，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　?、垌樸K單獨(dú)作用時(shí)，與對(duì)照組相比，各處理組均顯著性抑制SGC-7901細(xì)胞增殖，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
　　④1-甲基乙內(nèi)酰脲與順鉑聯(lián)合作用，同等濃度下對(duì)SGC-7901細(xì)胞增殖的抑制作用明顯優(yōu)于二者單獨(dú)作用，具有顯著性差異(p<0.01)。
　　2.劃痕實(shí)驗(yàn)24h后觀察結(jié)果表明：1-甲基乙內(nèi)酰脲及順鉑處理的SGC-7901細(xì)胞，對(duì)照組修復(fù)的要比

5、實(shí)驗(yàn)組多，寬度變小，實(shí)驗(yàn)組的傷痕寬度變化小。在48h后，對(duì)照組的劃痕變窄，幾乎處于愈合，而實(shí)驗(yàn)組的劃痕變化比對(duì)照組小，且兩者聯(lián)合作用時(shí)效果更佳。各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組差異具有顯著性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：用藥后腫瘤細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力減弱，結(jié)果提示：1-甲基乙內(nèi)酰脲和順鉑能抑制細(xì)胞遷移，
　　3．Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與對(duì)照組相比，使用1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑和兩藥聯(lián)合均能抑制SGC-7901細(xì)胞的侵襲，且兩藥聯(lián)合對(duì)抑制SGC-7901細(xì)

6、胞的侵襲效果最佳。
　　4. RT-PCR實(shí)驗(yàn)：結(jié)果顯示，MMP9、CD44V6mRNA在SGC-7901細(xì)胞中均有表達(dá)。用1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑及兩者聯(lián)合處理后，SGC-7901細(xì)胞中 MMP9、CD44V6 mRNA表達(dá)降低。
　　5. Western-blotting實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與對(duì)照組相比，1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑、兩者聯(lián)合用藥處理細(xì)胞后，MMP9、CD44V6蛋白表達(dá)下調(diào)，且1-甲基乙內(nèi)酰脲、順鉑兩者聯(lián)合用藥效果最