抗原ELISA檢測試劑盒和膠體金試紙條用于禽白血病病毒檢測時的比較研究.pdf

1、禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus，ALV）自1908年首次被分離并報道以來，隨后的幾十年里世界各地都有該病的爆發(fā)與流行，這說明禽白血病已廣泛分布于世界各地，由ALV感染所引發(fā)的臨床和亞臨床感染，給養(yǎng)禽業(yè)帶來了較大的經(jīng)濟(jì)損失，也引起了世界各地養(yǎng)禽業(yè)的足夠重視。從上世紀(jì)70代以來，世界各大國際跨國育種公司都在雞群中采取了一系列清除和凈化ALV的措施，現(xiàn)如今，各發(fā)達(dá)國家的養(yǎng)禽業(yè)已經(jīng)基本消滅和控制住了經(jīng)典的外源性禽白血病病

2、毒在規(guī)?；B(yǎng)雞場的流行，但在我國雞群中，ALV感染仍十分普遍。隨著ALV的診斷鑒別方法越來越多，國內(nèi)養(yǎng)禽業(yè)對禽白血病病毒不同鑒別方法的關(guān)注度越來越高。那么，選擇靈敏度高和特異性強(qiáng)的檢測方法無疑可以讓各原種雞場和商品代雞場有效的防控禽白血病，還能減少不必要的損失。
　　1.不同ELISA試劑盒和膠體金試紙條對細(xì)胞上清中P27的檢測比較
　　為比較不同禽白血病病毒（ALV）抗原ELISA檢測試劑盒和膠體金試紙條的靈敏度，本研究將

3、A、B、J三種不同ALV亞群分別以50TCID50、100TCID50、500TCID501000TCID50、10000TCID50五種劑量接種培養(yǎng)于對數(shù)生長期的DF-1細(xì)胞上，2h后換含2％胎牛血清的細(xì)胞維持液，接種后第2-8天每天收取細(xì)胞上清并補(bǔ)充等量的DMEM，每份上清用三種不同的抗原ELISA檢測試劑盒（A、B、C）和兩種膠體金試紙條（D、E）按照各自的說明書同時檢測。結(jié)果顯示，三種亞群的五種劑量分別應(yīng)用A、B、C三種ELIS

4、A檢測試劑盒靈敏度基本一致，但在針對三種亞群病毒接種的的個別劑量個別天數(shù)時，ELISA-B試劑盒的靈敏度要略高于A和C；兩種膠體金試紙條的抗原檢出時間檢測結(jié)果完全一致，但其靈敏度均要比ELISA檢測試劑盒的低，在接種低劑量的病毒時，膠體金試紙條的抗原檢出時間要比ELISA試劑盒延后1-2天，但在接種高劑量的病毒或者到了低劑量病毒復(fù)制增殖的后期時，膠體金試紙條能夠更快速的做出判定，相比試劑盒節(jié)省了不少時間。
　　2.不同ELISA試

5、劑盒和膠體金試紙條對蛋清中P27的檢測比較
　　在本研究中，應(yīng)用卵黃囊接種對90只SPF種雞分別接種了A、B、J三個亞群的ALV病毒，每隔4周對雞采血做病毒分離，選擇持續(xù)產(chǎn)生病毒血癥的母雞，待其生長至產(chǎn)蛋期收集種蛋，收集的蛋與雞編號一一對應(yīng)，用抗原ELISA檢測試劑盒A、B和膠體金試紙條D、E對60枚種蛋蛋清進(jìn)行了檢測，并將檢測結(jié)果與病毒分離的結(jié)果相對比，結(jié)果顯示膠體金試紙條與病毒分離的吻合率不超過60%，而檢測試劑盒的吻合率最高