高糖培養(yǎng)下益腎膠囊對(duì)腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3、TGF-β1表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:觀察高糖培養(yǎng)下益腎膠囊含藥血清對(duì)腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3、TGF-β1表達(dá)的影響,進(jìn)一步探討益腎膠囊在防治糖尿病腎病的作用機(jī)制。
  方法:體外培養(yǎng)大鼠腎小管上皮細(xì)胞,健康清潔級(jí)雄性SD大鼠40只,適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,大鼠藥物灌胃后取血制備成含藥血清。按隨機(jī)數(shù)字法分為7組,其中10只體重、鼠齡、一般狀況相近的為正常對(duì)照組,余30只依次分為隨機(jī)分為:高糖組、小劑量益腎治療組(0.625g/kg/d)、中劑量益腎治療組(1.25

2、g/kg/d)、大劑量益腎治療組(2.5g/kg/d)及貝那普利治療組(30 mg/kg/d)。采用Western blot免疫印跡檢測(cè)大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3及TGF-β1的表達(dá);Real-time PCR(實(shí)時(shí)定量熒光PCR)檢測(cè)大鼠腎小管上皮細(xì)胞中SOCS-3mRNA的表達(dá)情況;免疫熒光化學(xué)染色法檢測(cè)各組大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3及TGF-β1的表達(dá)情況。
  結(jié)果:Real-time PCR結(jié)果示:高糖刺激下大鼠

3、腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3mRNA與正常組相比明顯增高(p<0.05);同高糖組比較,在含藥血清干預(yù)下SOCS-3mRNA表達(dá)進(jìn)一步增多(p<0.05);免疫熒光化學(xué)染色法及Western blot檢測(cè)結(jié)果均提示:與正常組比較下,高糖刺激下大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3與TGF-β1二者蛋白表達(dá)量均明顯增高(p<0.05);同高糖組比較,經(jīng)含藥血清干預(yù)后大鼠腎小管上皮細(xì)胞SOCS-3表達(dá)呈現(xiàn)進(jìn)一步增多,而大鼠腎小管上皮細(xì)胞TGF-β1表

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