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文檔簡介
1、目的：探討Gremlin1與腎纖維化的關(guān)系及大黃素對TGF-β1誘導(dǎo)的腎小管上皮表達Gremlin1的影響。 方法：(1)在人腎小管上皮細胞(HK-2)培養(yǎng)的基礎(chǔ)上。以TGF-β1誘導(dǎo)細胞轉(zhuǎn)分化并作為陽性對照，觀察不同濃度大黃素干預(yù)轉(zhuǎn)分化細胞生長。實驗分組：A：正常對照組(無血清培養(yǎng)基)，B：陽性對照TGF-β1(2ng/m1)，C： TGF-β 1(2ng/m1)+大黃素(10 ug/m1)，D：TGF-β1(2ng/m1)+
2、大黃素(20 ug/m1)E：TGF-β1(2ng/m1)+大黃素(40 ug/m1)。(2)處理12h、24h、48 h后，實時熒光定量PCR檢測12h組細胞Gremlin1mRNA含量的表達；免疫印跡法(Westernblotting)檢測24h、48 h組Gremlin。蛋白的表達.(3)選取不同病因的原發(fā)性腎小球腎炎腎活檢標(biāo)本40例，根據(jù)光鏡下小管間質(zhì)的病變程度評級分4組，免疫組化法檢測Gremlin1表達，與患者血肌酐水平(S
3、cr)，24h尿蛋白定量(24hRpro)進行相關(guān)性分析。 結(jié)果：(1)2ng/m1 TGF-β1刺激HK-2細胞12h、24h、48h可上調(diào)Gremlin1表達。(2)隨著大黃素濃度梯度(10 ug/ml、20 ug/m1、40 ug/m1)的增加，Gremlin1基因及蛋白表達水平逐漸下降(P<0.05).(3)正常腎組織無Gremlin。表達，纖維化腎組織Gremlin4表達增多。并且其表達量與Scr呈正相關(guān)(r=0.81
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