高脂高膽固醇飲食所致小鼠肺部炎癥中Api6的表達(dá)及其功能的研究.pdf

1、背景:近年來大量研究證實(shí)高脂飲食引起的脂代謝紊亂是許多器官損傷的重要原因。然而高脂特別是高膽固醇飲食在野生型的C57BL/6J小鼠肺部的影響少有報(bào)道，而且在此模型下細(xì)胞凋亡抑制因子6(Api6)對(duì)肺部炎癥的影響未見報(bào)道。
　　目的:研究高脂高膽固醇飲食是否可致野生型C57BL/6J小鼠的肺部的炎性反應(yīng)，以及在高脂高膽固醇飲食模型下凋亡抑制因子6的表達(dá)及其發(fā)揮的作用和可能的機(jī)制。
　　方法:6～8周齡的C57BL/6J雄性小鼠

2、喂養(yǎng)于SPF環(huán)境中，隨機(jī)分成兩組，分別給予普通飲食或高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)16周后取材實(shí)驗(yàn)。采用免疫組織化學(xué)方法和人工計(jì)數(shù)肺泡灌洗液細(xì)胞檢測(cè)肺組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)情況。實(shí)時(shí)定量PCR和Western blot鑒定Api6和LXR-αmRNA與蛋白表達(dá)水平，流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)小鼠支氣管肺泡灌洗液細(xì)胞凋亡情況。體外培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7檢測(cè)Api6對(duì)oxLDL引起細(xì)胞凋亡的影響。MTT法檢測(cè)重組Api6蛋白對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7

3、增殖影響。
　　結(jié)果:高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)小鼠16周后，C57BL/6J小鼠肺組織出現(xiàn)明顯的巨噬細(xì)胞蓄積。與普通飲食組相比，高脂高膽固醇飲食喂養(yǎng)小鼠肺組織Api6基因和蛋白表達(dá)都顯著上調(diào)，同時(shí)支氣管肺泡灌洗液中的巨噬細(xì)胞凋亡水平明顯下降.體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)500ng/ml的重組rApi6處理RAW264.7巨噬細(xì)胞24h，可顯著抑制oxLDL引起的細(xì)胞凋亡。MTT實(shí)驗(yàn)證實(shí)500ng/ml重組rApi6可以抑制由oxLDL引起巨噬細(xì)胞活性