益生性乳酸菌的分離篩選及拮抗沙門氏菌感染功能的研究.pdf

1、乳酸菌因其益生功能而備受關(guān)注，研究者眾多。本研究首先自青貯飼料和酸奶樣本中分離乳酸菌。根據(jù)菌落的形態(tài)特征、革蘭氏染色、過氧化氫酶接觸試驗(yàn)、生理生化特性、16SrDNA序列分析和碳水化合物試驗(yàn)對其進(jìn)行鑒定。然后通過耐受人工胃液、耐受膽鹽和粘附力等試驗(yàn)篩選具有益生潛能的菌株。并用篩選出的乳酸菌刺激小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞檢測其分泌的細(xì)胞因子的水平，篩選出有誘導(dǎo)Th1/Th2型免疫應(yīng)答潛能的乳酸菌。最后用篩選出的5株乳酸菌連續(xù)灌胃小鼠6周，然后對其

2、進(jìn)行沙門氏菌感染，觀察發(fā)病及死亡情況，HE染色檢驗(yàn)小鼠腸道病理變化，ELISA檢測小鼠腸道炎性因子IL-6和TNF-α分泌量，觀察小鼠體重和脾臟、肝臟的變化及沙門氏菌在體內(nèi)的定植量，研究其在小鼠體內(nèi)拮抗沙門氏菌感染的功能。
　　結(jié)果顯示，從青貯飼料和酸奶樣品中分離出34株乳酸菌，經(jīng)鑒定分別屬于10個(gè)種:L.brevis、L.kefiri、L.parabuchneri、L.farciminis、L.mnudanjiangensis、

3、L.mudanjiangensis、L.coryniformis、L.pantheris、L.rhamnosus、L.casei。其中同型發(fā)酵乳酸菌占91.2％，部分菌株體現(xiàn)耐高溫、低溫、低pH生長的特性。經(jīng)過耐受人工胃液、耐受膽鹽、粘附力以及刺激小鼠骨髓樹突狀細(xì)胞分泌細(xì)胞因子能力檢驗(yàn)，篩選出14株具有益生潛能的菌株。將菌株TCP009、SXJ30、SXJ32、SXJ29、TCP027分別灌胃小鼠6周后對其進(jìn)行攻毒并觀察免疫保護(hù)作用。結(jié)