馬鈴薯瘡痂病的分離和檢測體系構建.pdf

1、馬鈴薯是繼水稻、小麥和玉米之后的世界第四大糧食作物，也是我國農民增收的重要途徑和糧食安全的重要保障。馬鈴薯瘡痂病是鏈霉菌引起的一種表皮性病害，多發(fā)生在北方，近年來，瘡痂病在我國一些南方馬鈴薯產區(qū)也頻繁發(fā)生，嚴重影響塊莖的外觀品質。本研究收集了廣東和湖北兩省的瘡痂病塊莖，進行了瘡痂病的分離鑒定，在此基礎上建立了瘡痂病的相關檢測體系，為瘡痂病的防控奠定了基礎，主要結果如下:
　　1.收集了廣東、湖北兩省五個地區(qū)的瘡痂病塊莖102個，觀

2、察分析了它們的癥狀類型，及在培養(yǎng)基上鏈霉菌的培養(yǎng)特征，孢子鏈形態(tài)，并從湖北襄陽的瘡痂癥狀塊莖中分離得到XY-12菌株;
　　2.通過表型和顯微觀察、16S rDNA測序，初步鑒定襄陽瘡痂病分離菌株XY-12為Streptomyces bottropensis，進一步的盆栽接種鑒定表明，該分離菌株在接種濃度1.68×103CFU/mL以上能夠導致馬鈴薯中薯5號產生瘡痂病癥狀;
　　3.在收集Streptomyces scabi

3、es、S.acidiscabies、S.bottropensis、S.stelliscabiei、S.europeascabiei五種致病菌的66條txtA基因序列的基礎上，設計了txtA的特異PCR引物CS-67s/379a，并對退火溫度以及模板、引物濃度進行了優(yōu)化;通過對田間樣品的檢測，表明該方法能特異檢測瘡痂病，能夠靈敏的檢測到106ng瘡痂病菌的DNA;
　　4.進一步基于txtA基因設計了5對RPA引物，經(jīng)檢測效果良好，