分子水平上調(diào)控細(xì)胞粘附和分離體系的構(gòu)建.pdf

1、生物材料科學(xué)是介于材料科學(xué)與生命科學(xué)之間并相互滲透而產(chǎn)生的一個(gè)重要邊緣學(xué)科。生物材料發(fā)展與進(jìn)步的根本源動(dòng)力是健康的需要。人們對(duì)生物材料與生命體相互作用的現(xiàn)象和規(guī)律進(jìn)行了深入研究。目前,生物材料的發(fā)展前沿在于生物相容性材料,納米生物材料,生物礦化材料和仿生智能材料等。本課題采用基底上固定能形成二聚體的一對(duì)α-螺旋多肽A和B及溫敏性高分子構(gòu)建了一類能在分子水平上精確控制細(xì)胞粘附和分離的體系,主要工作有以下內(nèi)容。
　　運(yùn)用分子生物學(xué)手段

2、設(shè)計(jì)和構(gòu)建了多肽Bcys、NcysA、和NcysARGD相應(yīng)的目的基因及多肽的表達(dá)及純化。由于是基因工程表達(dá)產(chǎn)物,這些多肽具有極佳的生物相容性和結(jié)構(gòu)可控性,通過(guò)在多肽末端引入半胱氨酸與其它溫敏材料連接,賦予分子多重特性?；蚬こ潭嚯腁與B中α-螺旋能通過(guò)疏水相互作用形成亮氨酸拉鏈的二聚體結(jié)構(gòu),顯示了其在形成復(fù)雜體系中的應(yīng)用潛能。
　　采用可逆加成-斷裂鏈轉(zhuǎn)移(RAFT)聚合反應(yīng)合成了一系列的溫敏高分子(mPEG-PNIPAM),通

3、過(guò)偶聯(lián)劑將溫敏高分子上的活性基團(tuán)和多肽Bcys上的半胱氨酸上的巰基形成多肽和高分子的偶聯(lián)物mPEG-PNIPAM-B。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,PNIPAM的溫敏效應(yīng)不因修飾上mPEG和多肽B而消失。
　　最后,通過(guò)多肽A和B能形成一對(duì)穩(wěn)定的二聚體結(jié)構(gòu),在多肽A上引入生物活性配體(RGD作為模型配體),通過(guò)多肽B上連接的溫敏性高分子和PEG來(lái)遮蔽固定在基底上的生物活性配體,通過(guò)溫敏的高分子開(kāi)關(guān)來(lái)調(diào)節(jié)多肽A上的活性配體和細(xì)胞相互接觸和分離,從而